中文摘要：

miRNAs是一类新近发现的重要的基因表达调控因子。我们前期试验结果提示转化生长因子β1相关的miR-181a可能是参与肝纤维化进程的重要分子。本研究拟首先检测体外培养肝星状细胞中抑制TGF-β1或Smad4对miR-181a表达的影响，继而采用染色体免疫沉淀分析和荧光素酶试验检测smad4能否和miR-181a基因启动子区结合，探讨调控miR-181a表达的机制。进而采用芯片技术和生物信息学方法预测miR-181a的靶基因，用western blot和荧光素酶分析验证其靶基因，以明确miR-181a发挥作用的分子机制。最后通过体外和体内试验观察miR-181a对大鼠肝纤维化的干预效果。本研究是国内外首次探讨特定miRNAs参与肝纤维化的分子机制，对明确miR-181a功能，进一步认识TGF-β1信号通路的调控机制和肝纤维化的发病机制具有重要意义，并可能为肝纤维化防治提供新的靶标。

结论摘要：

背景 miRNA在疾病进程中有重要作用，本课题探讨miR-181a在大鼠肝纤维化进程中的作用和机制。方法 检测体外培养肝星状细胞中抑制TGF-β1 或Smad4 对miR-181a 表达的影响；采用芯片技术和生物信息学方法预测miR-181a 的靶基因，用western blot 和荧光素酶分析验证其靶基因，通过体外和体内试验观察miR-181a 对大鼠肝纤维化的干预效果。结果 TGF-β1和Smad4均明显促进HSC-T6中miR-181a和miR-181b的表达，基因芯片结果发现miR-181a或miR-181b可改变HSC 细胞基因表达，并证实P27是miR-181b的靶基因。体外培养结果显示miR-181a促进HSC-T6表达α-SMA和ColⅠA2 ，miR-181b促进HSC-T6细胞增殖。miR-181b在肝硬化患者血清中表达明显升高，而miR-181a的表达水平无明显变化，anti-miR-181a可显著抑制CCL4诱导的大鼠肝纤维化。结论 miR-181a和miR-181b是TGF-β1下游参与肝纤维化进程的重要分子，并且miR-181a和miR-181b的作用有所不同。