中文摘要：

本课题设计了NT4信号肽和引导肽介导的分泌表达P53氨基短活性肽和具有蛋白质转导结构域(PTD)的Ant融合肽，并选用重组慢病毒高效表达载体进行转导。目标是建立治疗实体瘤的安全、有效的生物学方法。采用分泌表达P53氨基端-Ant(渗透肽)融合肽技术，不但能促进转导了重组病毒的肿瘤细胞自身发生凋亡，而且还能发挥旁观者效应，并能进入未转染重组病毒的肿瘤细胞核内发挥生物效应，结合重组慢病毒载体，在确保重组复制缺欠病毒安全性的同时，能延伸融合基因表达时间和对未转染重组病毒的残留肿瘤细胞和转移肿瘤细胞的杀伤作用。希望通过转导效率的提高和转导细胞的自杀及杀伤旁观者效应带来肿瘤、尤其是实体瘤基因治疗的新突破。

结论摘要：

抗肿瘤肽研究是近年来出现的肿瘤治疗的一个新领域。研究证实一些小分子肽类物质如来源于人p53氨基端MDM2结合区（12～26位氨基酸）的p53短肽（由15个氨基酸构成）异源融合一种由17个氨基酸构成的黑腹果蝇触足肽（Antenapedia, Ant）后，可直接引起胰腺癌、乳腺癌细胞的坏死，而对正常细胞少有毒性。但将抗肿瘤肽直接用于实体瘤的治疗却存在许多限制，如稳定性差、体内的半衰期短，难以达到有效的药物浓度、价格昂贵等。本研究成功克隆了p53(N15)-Ant融合基因，利用慢病毒载体的基因转导系统，使细胞可持续表达抗肿瘤肽，从而克服肽治疗肿瘤过程中存在的稳定性差、半衰期短、生物利用度低等问题，其次我们在抗肿瘤肽的氨基端增加了一个神经营养因子4(NT4)的信号肽和前导区，使新合成的抗肿瘤肽可被细胞分泌表达，从而促进抗肿瘤肽由被转染的靶细胞进入未能转染重组病毒的靶细胞内，试验证实可显著抑制转导了重组病毒的人肝癌HepG2、卵巢癌SKOV3的生长；分泌的抗肿瘤肽有旁观杀伤效应；并可显著抑制裸鼠HepG2细胞在体肿瘤的生长，使肿瘤细胞发生坏死。而对正常细胞NIH3T3、ECV304生长没有影响。