中文摘要：

竞争免疫分析方法在赭曲霉毒素A、黄曲霉毒素B1等真菌毒素的快速检测中发挥着重要的作用，但该类方法须使用真菌毒素与载体偶联制备竞争抗原，给试剂的生产和使用者带来毒性危害。研制这些毒素的模拟表位、以之建立无毒害的免疫学检测方法具有较大的科学价值和应用前景。本研究通过噬菌体随机肽库技术，以赭曲霉毒素A单克隆抗体为靶标，成功筛选到11种模拟表位；但这些模拟表位都是表达在次要衣壳蛋白上，拷贝数量太少，无法将其直接应用于竞争抗原的制备。本研究通过分子生物学方法，应用PC89噬菌粒载体，将赭曲霉毒素A的模拟表位导入至M13噬菌体的主要衣壳蛋白pⅧ上，并引入了肠激酶切割位点，通过单克隆抗体结合及DNA测序验证，获得了在N末端高密度表达模拟表位的重组噬菌体；再以其为竞争抗原，建立了新的竞争酶联免疫吸附检测（ELISA）方法，并对该方法的各项技术指标进行综合测试和对比实验；研究证明该方法在检测的灵敏度、准确度和精确度等方面与传统ELISA方法一致，并已经成功将该方法应用于建立黄曲霉毒素B1的竞争ELISA检测方法，本研究为类似的有毒物质的免疫学检测方法探索了一条高效、低成本、无毒害的制备竞争抗原的新方法。