中文摘要：

以我们已建立的内毒素耐受的小鼠腹腔巨噬细胞（RAW264.7）为模型，在明确糖皮质激素（GC）具有逆转内毒素耐受作用的基础上，利用RNA干扰技术特异性地阻断糖皮质激素受体（GR）的表达，观察内源性GR阻断后，GC是否仍能逆转内毒素耐受，以明确GR是否参与介导了GC逆转内毒素耐受的作用；同时，我们将研究GC逆转内毒素耐受时PKC-alpha、IRAK和ERK1/2表达和活性的改变，并观察用特异性阻断剂分别或同时阻断PKC-alpha、IRAK和ERK1/2对GC逆转内毒素耐受作用的影响，从而探讨GC逆转内毒素耐受的可能的信号转导途径。本项目研究拟在受体及细胞内信号转导两方面阐明GC逆转内毒素耐受的分子机制。

结论摘要：

糖皮质激素（GC）在内毒素血症治疗过程中的作用及其机制至今尚未阐明。本课题以我们已建立的内毒素耐受的小鼠腹腔巨噬细胞（RAW264.7）为模型，首先明确了GC确实具有逆转内毒素耐受的作用，且此作用不能被糖皮质激素受体（GR）阻断剂RU486所阻断。进一步利用RNA 干扰技术特异性地阻断GR表达后，我们观察到内源性GR 阻断后，GC仍能逆转内毒素耐受，以上结果提示GC可以通过GR非依赖的机制逆转内毒素耐受。同时，我们还研究了GC 逆转内毒素耐受时的信号转导机制，结果表明在我们的内毒素耐受巨噬细胞模型中，PKC-alpha蛋白表达显著降低，而ERK1/2和IRAK表达改变并不明显，而GC则可能通过促进PKC-alpha蛋白表达及磷酸化从而起到逆转内毒素耐受的作用，且GC的此作用同样可以不依赖于GR而完成。本课题研究表明，在内毒素耐受的状况下，GC可以通过不依赖于GR的机制提高巨噬细胞的反应性，从而逆转内毒素耐受。这些结果同时提示了GC除了经典的GR依赖的抗炎作用以外，在某些情况下还可能存在着不依赖于GR的促炎作用的可能性，这无疑丰富了我们对于GC作用机制的理解。