背景及目的甲状腺癌发病机制尚不明确。通过筛选在甲状腺癌与正常甲状腺组织之间差异表达的基因,有助于阐明甲状腺癌发生发展的分子机理,为开发特异性的基因诊断,治疗药物提供新途径。方法(1)应用抑制性消减杂交构建人甲状腺癌消减cDNA文库 (2)克隆,鉴定甲状腺癌特异性高/低表达的基因,与人类EST序列库进行匹配性分析 (3)RNA印迹分析验证侯选基因 (4)用cDNA末端快速扩增法(RACE)进行全长基因序列扩增 (5)通过电子克隆对筛选到的基因进行染色体定位(6)运用生物学软件进行初步功能分析。结果成功构建了高消减效率的人甲状腺癌cDNA消减文库,正向SSH产物中有3个EST与来源于其他恶性肿瘤的EST有100%同源性,提示它们来自恶性肿瘤相关基因,其中18号序列通过电子克隆(ePCR)技术初步定位于1号染色体长臂1q21,通过初步功能分析,认为其可能来自某种钙结合蛋白基因,该蛋白在多种组织来源的肿瘤中存在高表达,但在甲状腺癌中的高表达尚属首次报道。反向SSH产物中有5个片段为未知新序列,可能来自于在甲状腺癌中特异性低表达的新基因,其中30号序列已通过Northern Blot验证,可能来自对甲状腺癌发生发展有抑制作用的新基因。
英文主题词Thyroid carcinoma ;Hybridization ;Genes