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甲状腺癌相关基因筛选、克隆、定位及生物学功能的研究
  • 项目名称:甲状腺癌相关基因筛选、克隆、定位及生物学功能的研究
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:39970346
  • 申请代码:H1623
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2000-01-01-2002-12-01
  • 项目负责人:文格波
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:南华大学
  • 批准年度:1999
中文摘要:

背景及目的甲状腺癌发病机制尚不明确。通过筛选在甲状腺癌与正常甲状腺组织之间差异表达的基因,有助于阐明甲状腺癌发生发展的分子机理,为开发特异性的基因诊断,治疗药物提供新途径。方法(1)应用抑制性消减杂交构建人甲状腺癌消减cDNA文库 (2)克隆,鉴定甲状腺癌特异性高/低表达的基因,与人类EST序列库进行匹配性分析 (3)RNA印迹分析验证侯选基因 (4)用cDNA末端快速扩增法(RACE)进行全长基因序列扩增 (5)通过电子克隆对筛选到的基因进行染色体定位(6)运用生物学软件进行初步功能分析。结果成功构建了高消减效率的人甲状腺癌cDNA消减文库,正向SSH产物中有3个EST与来源于其他恶性肿瘤的EST有100%同源性,提示它们来自恶性肿瘤相关基因,其中18号序列通过电子克隆(ePCR)技术初步定位于1号染色体长臂1q21,通过初步功能分析,认为其可能来自某种钙结合蛋白基因,该蛋白在多种组织来源的肿瘤中存在高表达,但在甲状腺癌中的高表达尚属首次报道。反向SSH产物中有5个片段为未知新序列,可能来自于在甲状腺癌中特异性低表达的新基因,其中30号序列已通过Northern Blot验证,可能来自对甲状腺癌发生发展有抑制作用的新基因。

结论摘要:

英文主题词Thyroid carcinoma ;Hybridization ;Genes


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