流感病毒分为A、B、C型流感病毒属。青海湖流域地处青藏高原东北部,具有高紫外线日照、青海湖高含盐量碱性水环境和低有机碳密度土壤等特殊环境。但目前对于青海湖周边地区流感病毒的分布格局以及种间动态了解甚少,至今还未见报道。前期我们沿青海湖流域的14个地区,采集了5000余份环境样品和部分野生动物样品。本申请旨在前期研究的基础上,采用经典分类方法和分子生物学检测技术,开展青海湖流域特殊环境流感病毒系统分类研究,包括两方面研究内容,一是对采样地点进行环境因素分析及病毒分离鉴定,明确特殊环境成分要素和病毒分布状态;二是开展特殊环境病毒分类生物学特性及种间进化研究。预期研究结果将明确病毒在青海湖流域的区系分类特征,揭示特殊环境因素对流感病毒系统分类的作用和影响,及病毒种间进化规律,阐明流感病毒在特殊环境中的分布、生存及消长的现象和规律,对流感病毒系统分类研究及病毒资源的发掘提供重要的科学依据。
Qinghai Lake Region;Special Environment;Influenza Virus;System Classification Feature;
本项目于2009年立项以来,研究工作进展顺利,运行良好,超额完成了预期目标,取得了多项研究成果1)在我国青海湖流域及华中地区的主要候鸟迁徙地,收集了疑似病毒样品18572份,包括野生动物(高原鼠)、野生鸟类(迁徙鸟、留鸟)、环境样品(青海湖、鄱阳湖水样品)和少数的人流感样品,在相应生物安全实验室内高致病性禽流感病毒的分离鉴定,获得新病毒分离株;2)成功建立了禽流感病毒的实验室快速检测方法,包括荧光定量RT-PCR方法、抗原和抗体检测技术;3)采用经典的鸡胚培养和细胞培养分离方法,获得了青海湖地区的5株禽流感病毒流行株,其他地区33株流感病毒株;完成了毒株全基因组序列测定及遗传进化分析,从分子水平揭示了我国青海湖流域禽流感病毒的分子进化特征及主要传播途径,明确了青海湖流域流感病毒株与其他地区流感病毒株的进化关系;4) 建立了从环境水样品中分离流感病毒的方法,通过对694份青海湖流域水样品进行流感病毒检测及分离鉴定,建立和完善了环境样品的前处理、病毒检测及分离培养技术;5)完成了不同亚型流感病毒分离株的致病性研究,评价了流行毒株对人畜健康的危害、潜在威胁及风险评估;6)在我国首次建立了首个青海湖流域AIV病毒库和专题数据库;7)本项目公开发表相关SCI收录论文6篇,获授权发明专利1项;8)培养了博士研究生2名,硕士研究生6名。 在项目管理方面严格执行科技部及中科院的相关管理制度,保障项目的有序进行。本项目从分子水平揭示了我国青海湖流域禽流感病毒的分子进化特征及主要传播途径及风险评估,研究成果为提高我国人口健康水平和公共卫生疫病的防治方面起到了积极作用,为高等级生物安全级病原的预防与控制研究提供了重要信息交流平台及技术支撑。