中文摘要：

脑胶质瘤因恶性程度高，侵袭性强，手术等传统疗法治疗效果不理想而一直是脑肿瘤的研究热点，国内、外学者研究发现声动力（SDT）具有杀伤其他部位恶性肿瘤的能力，但具体机制及在脑胶质瘤治疗中应用的可行性不明。因超声穿透力强，加之我们前期研究发现其具有良好的杀伤胶质瘤细胞的作用，故本研究在此基础上，拟采用C6胶质瘤细胞系、荷瘤动物模型为实验材料，应用生物化学、分子生物学、免疫学及形态学等学科领域较新的研究方法，探讨SDT对C6细胞的杀伤率，从形态学变化及触发细胞损伤和凋亡功能改变的敏感位点、凋亡途径、相关基因的改变，对肿瘤微血管的损伤和再生的影响，以及在荷瘤动物模型形态学、影像学改变的研究，筛选出SDT杀伤C6的超声及声敏剂的最佳参数，明确具体的分子生物学机制，观察SDT与光动力疗法、化疗、基因治疗、细胞靶向及血管靶向治疗是否有协同作用，从而为SDT将来应用于胶质瘤临床治疗提供充分实验依据。

结论摘要：

⑴使用大鼠C6胶质瘤细胞／大鼠颅内C6胶质瘤模型为实验材料，研究SDT的效果及机理，筛选最佳超声频率、声强度、作用时间，确定合适的声敏剂及其剂量。我们应用各类氧自由基淬灭剂通过MTT法测定其在SDT杀伤大鼠C6胶质瘤细胞中的作用基础上，探讨其机理，鉴别自由基的来源。实验中我们兼顾正常神经细胞的安全性，确定SDT杀伤大鼠C6胶质瘤的理想超声参数、筛选较理想的声敏剂，建立剂量效应关系。由于肿瘤的生长转移和复发与肿瘤微血管的损伤和再生都有重要关系，在探索研究SDT对肿瘤细胞的直接影响的同时，我们还观察研究SDT对微血管的影响，并首次建立细胞靶向SDT和血管靶向SDT的概念和理论基础，以上研究分别在离体细胞和在荷瘤大鼠模型上完成。检测技术包括MTT法测定抑瘤率，影像学、光镜、电镜和免疫组化观察损伤性质。通过研究SDT杀伤大鼠C6胶质瘤的系统研究，为未来的临床应用提供技术依据,。 ⑵使用C6胶质瘤细胞／大鼠C6胶质瘤为模型，研究SDT诱导细胞凋亡的途径及其调节因素，建立凋亡与相关基因表达的关系，确定对大鼠C6胶质瘤细胞的作用敏感周期。研究表明SDT能诱导肿瘤细胞发生凋亡，其凋亡途径有可能依赖于线粒体结构损伤后释放细胞色素C等蛋白，激活Caspase家族蛋白，从而导致细胞凋亡.我们在离体和在体两个方面，通过原位细胞凋亡检测、流式细胞仪测定、免疫组化、电泳技术、PCR技术等技术手段确定凋亡的主要途径、调节因素及相关基因表达。在掌握了特异性的SDT介导的凋亡机制后，通过调节因素来提高SDT诱导的凋亡的效应，在基因分子水平上调控SDT，改善SDT杀伤肿瘤的疗效,并进一步阐明其在亚细胞水平的作用变化规律。 ⑶SDT与其他肿瘤细胞杀伤方法的协同作用本项目在探索和完善SDT杀伤脑胶质瘤的新技术的同时，研究SDT与其他肿瘤细胞杀伤方法的协同作用，本项目将SDT与光动力疗法等治疗手段联用，在C6胶质瘤细胞和/或荷瘤动物体内通过MTT法测定抑瘤率，光镜、电镜观察肿瘤组织细胞和亚细胞结构，MRI和CT观察影像学变化，综合评估联用以上方法对C6胶质瘤细胞的协同作用，为合理应用SDT提供理论依据，为SDT的临床应用作好前期准备工作。