中文摘要：

蛋白磷酸酶2A(PP2A)通过对信号通路靶分子的去磷酸化调节细胞功能和转归。我们研究表明PP2A-B亚基基因启动子区单体型调控高表达的肝细胞对外源物诱导毒性存在差异；但其多态性与核受体介导的转录调控机制和对细胞功能效应的关系尚待阐明。本项目首先功能学试验确证孕烷X受体(PXR)活化对不同B亚基基因多态性位点结合和启动子功能的影响；再分析B亚基基因5'调控区(5'RR)单体型介导的受控高表达对细胞功能反应通路的底物靶向性和调节作用；进而比较外源化学物处理细胞模型中信号级联的调节以及细胞毒性和转归的变化特征；选取外源物暴露人群进行基因多态性单体型-功能效应表型关联性的验证。阐明PP2A-B亚基基因5'RR单体型影响与PXR相互作用及其受控表达介导外源物诱导细胞毒性和生物学功能的分子机制；探索以PP2A为核心新的调控模式和标志物，为环境暴露易感人群毒作用进程的早期评价和个体干预提供有效的新靶点。

结论摘要：

项目背景蛋白磷酸酶2A(PP2A)通过对信号通路关键靶分子的去磷酸化，在调节细胞功能、毒性损伤、效应转归中起重要作用；孕烷X受体(PXR)作为细胞的感受器，参与外源化学物代谢和信号级联的调控。基因调控区(RR，包括5’侧翼端启动子区和3’UTR)多态性(rSNPs)和microRNAs(miRNAs)可通过遗传和表观遗传调节模式影响目的基因的转录和表达而参与细胞毒性调控机制。PP2A、PXR和miRNAs介导的外源化学物毒性作用成为研究热点。本项目旨在进一步探明PP2A亚基基因rSNPs与核受体互作的调控机制及其与外源化学物诱导肝细胞毒作用功能效应的关系。主要研究内容首先功能学试验确证PP2A亚基基因rSNPs的调控功能和PXR活化的影响；再分析rSNPs介导的B亚基受控表达对细胞内信号底物的去磷酸化；进而比较外源化学物处理细胞模型中信号级联的调节以及细胞损伤和毒性转归的变化特征；人群中进行调控区多态性-功能效应表型关联性的验证。重要结果探索了PP2A亚基基因启动子区多态性经由PXR介导的转录调控和3'UTR多态性经由靶向miRNAs介导的表观遗传调控模式；探明了PP2A亚基多态性调控参与不同外源化学物诱导肝细胞毒性损伤和转归的差异性、及其与人群HCC的关联性。关键数据(1)PP2A不同亚基5’RR和3’UTR的调控活性、及其转录因子和甲基化调控或靶向miRNAs的调节模式研究；(2)B55δ、B56γ调控表达细胞中经由诱导PXR活化、miR-133b调控，参与NF-κB、p53和细胞周期通路中信号分子磷酸化的研究；(3)不同外源受试物(如Cd、DEHP、AFB1、cDDP等)经由PP2A亚基表达调控诱导内质网应激、线粒体自噬和质量控制(MQC)、细胞自噬、脂质蓄积、坏死性凋亡、细胞周期阻滞等毒性损伤和转归差异性的功能性效应研究；(4)PPP2R1A基因、PPP2R2D基因3’UTR+15G>C多态性与人群HCC易感性的关联性分析。 (数据参见报告正文) 科学意义阐明PP2A亚基基因5’RR和3’UTR多态性经由与PXR和miRNAs的调控作用、参与外源化学物诱导肝细胞毒性和转归功能学作用的多层次分子机制；筛选了以PP2A为核心的潜在生物标志(如ERS、COX-2、MQC等)；为环境暴露诱导肝细胞损伤早期评价和致癌易感人群的干预提供新靶点。