中文摘要：

TIPE2 是 TNFAIP8 家族的新成员，可调控 FasL 介导的凋亡，在系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞中低表达，表明其可能参与细胞凋亡及免疫稳态的调控。我们前期研究发现 TIPE2 在 RA 滑膜中低表达，死亡受体 5 在 RA 滑膜高表达；Anti-DR5 mAb 能缓解 RA 病情，使 TIPE2 表达上调，降低血液和滑膜组织中炎性细胞因子，诱导滑膜细胞和淋巴细胞凋亡。DR5 在 RA 滑膜细胞高表达，并未介导滑膜细胞凋亡， RA 滑膜反而增生，提示 TIPE2 可能是 RA 发病环节中的关键分子之一。为此，本课题拟以 Anti-DR5 mAb 为凋亡诱导剂，以 RA 滑膜成纤维细胞，RA 动物模型为实验材料以 TIPE2 为中心点，分别促进和阻断 TIPE2 的表达，分析在 RA 的发病中 TIPE2 对细胞免疫的调控，对 DR5 介导的细胞凋亡的调控。

结论摘要：

背景类风湿性关节炎是一种慢性自身免疫性疾病，以滑膜组织炎性增生、关节软骨进行性破坏为特征。RA 患者滑膜组织中凋亡细胞频率较低，其生长性质及病理学行为在许多方面类似于肿瘤组织的特性。TNF/TNFR 超家族与类风湿性关节炎发生有关联。TNFAIP8被认为对凋亡有调控作用。TNFAIP8 包括一个死亡效应结构域，并且能够抑制 caspase 介导的凋亡。剔除 TNFAIP8 在肿瘤细胞的表达能减少其致肿瘤性。TIPE2 是 TNFAIP8 家族的新成员，它对维持免疫稳态是非常必须的。TIPE2 优先表达于淋巴组织中，巨噬细胞，B 细胞和 T 淋巴细胞在不同的发育阶段共同组成表达 TIPE2。鼠缺失 TIPE2 将会导致各种器官炎症，脾大，早产儿死。TIPE2 可以负向调控 T 细胞活化从而干扰其介导的细胞免疫，在 TIPE2 缺失时 CD4+ 和 CD8+T 细胞的死亡减少。当 FasL 启动凋亡时 TIPE2 连接 caspase-8 并抑制 AP-1、NF-κB 的激活，抑制 caspase-8 能够阻断对缺失 TIPE2 细胞的高度敏感性。TIPE2 在 AP-1 水平负向调控 JNK、p38 和 NF-κB 途径，当 TIPE2 敲除时 NF-κB 连结 DNA 也增加。在敲除 TIPE2 的细胞 FasL 介导的凋亡被明显阻断。方向TIPE2 在RA 发病中的作用机制，分析在 RA 的发病中 TIPE2 对淋巴细胞介导的细胞免疫的调控，对DR5 介导的细胞凋亡的调控。主要内容我们已研究证实TIPE2 在 RA 滑膜中没有表达，死亡受体 5 在 RA 滑膜高表达；Anti-DR5 mAb 能缓解鼠 RA 病情，降低关节肿胀，降低血液和滑膜组织中炎性细胞因子；通过caspase途径诱导滑膜细胞和淋巴细胞凋亡。DR5 在鼠 RA 滑膜细胞高表达，没有诱导滑膜细胞凋亡，RA 滑膜反而增生，TIPE2 与 RA 滑膜增生有何关联。为此，本课题以 Anti-DR5 mAb及Anti-DR5ScFv 为凋亡诱导剂，以人、鼠 RA 滑膜成纤维细胞（FLS）为实验材料，通过MigR1-TIPE2质粒转染提高FLS中TIPE2 的表达，分析在 RA 的发病中 TIPE2 对诱导FLS凋亡的影响；对淋巴细胞介导的细胞免疫的影响。重要结果体外成功分离培养人RA患者、大