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双水相系统下泼尼松龙的微生物转化及反应过程中细胞色素P450酶的调控作用机制研究
  • 项目名称:双水相系统下泼尼松龙的微生物转化及反应过程中细胞色素P450酶的调控作用机制研究
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:20876088
  • 申请代码:B0608
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2009-01-01-2011-12-31
  • 项目负责人:王洪钟
  • 负责人职称:副教授
  • 依托单位:清华大学
  • 批准年度:2008
中文摘要:

微生物转化法与传统化学合成反应相比,具有产物立体选择性高,反应条件温和、简单的优点,是清洁绿色合成方法。本课题以泼尼松龙为底物,利用生物转化方法以期得到一些有着重要生物活性的产物。通过大量菌种筛选,发现玫瑰产色链霉菌(Streptomyces roseochromogenes)能够转化泼尼松龙,并得到两个产物,其中之一是制备奈德类药物关键中间体16α-羟基泼尼松龙,另外一个经结构确证为新化合物20β-羟基泼尼松龙(11β,17α,20,21- 四羟基孕甾-1,4-二烯-3-酮)。进一步研究了培养基组成和发酵条件等因素对转化产率的影响,得到较优化的转化工艺,16α-羟基泼尼松龙转化率为14%,20β-羟基化产物收率达到92%。通过羟化酶反应动力学、酶含量、酶的诱导和活性研究,获得调控催化反应最适条件以及提高酶催化活力和稳定性的方法,进一步了解羟化酶作用机制。最后,根据羟化酶为胞内酶,而泼尼松龙水溶解度极小,微生物壁膜的阻碍大的问题,设计了聚乙二醇双水相催化反应系统。

结论摘要:

英文主题词biotransformation; prednisolone; 20β-hydroxyprednisolone;16α-hydroxyprednisolone;cytochrome P450 enzymes


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