获得了9个抗癌晶体蛋白基因,借助表达载体pET-21b在大肠杆菌中实现了高效表达,表达产物经镍柱亲和纯化后定量,考察其不同浓度下(0、6.25、12.5、25、50、75、100 μg/ml)作用24小时后的抗肝癌(细胞系SMMC7721和Bel7402)效果。结果显示,9个基因的表达产物在抗肝癌活性方面差异很大。其中,P11和P32对肝癌细胞系SMMC7721(IC50分别为2.03 μg/ml和1.31 μg/ml)和Bel7402(IC50分别为1.67 μg/ml和1.63 μg/ml)具有显著抑制作用,对正常肝细胞Chang-liver的毒性要低得多(IC50分别为>10 μg/ml和5.13 μg/ml),表明P11和P32对肝癌细胞具有选择性杀伤作用,有希望开发成为新型高效低毒的抗肝癌药物。重点研究了P32对肝癌细胞系SMMC7721的作用机理。P32(终浓度为50 μg/ml)与癌细胞共培养6小时后细胞发生肿胀、核膜发生分离、染色质发生浓缩,表明其通过诱发人肝癌细胞SMMC7721的凋亡,从而抑制细胞增殖。
英文主题词parasporin; gene expression;hepatoma cell lines; cell apoptosis