中文摘要：

葡萄膜炎是一种严重损害视觉健康的免疫性眼病，目前多采用激素及免疫抑制剂治疗，但副作用严重。清开灵注射液治疗本病效果确切，但全身应用易发生过敏反应，且眼局部药物浓度低，长期使用的依从性差致应用受限。我院作为国家中管局"十一五"重点专病葡萄膜炎协作组组长单位，组织国内9家附院对我院研制的清开灵眼用凝胶治疗本病进行了临床观察，疗效肯定。我们的前期研究表明Th1、Th17在实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）发病中作用明确。本课题拟在前期研究的前提下，对清开灵眼用凝胶进行角膜渗透性、药效学等体外药理学研究；建立EAU模型，进行干预研究，采用分子及细胞生物学、免疫学等技术检测Th1、Th17的增殖、分化，大鼠外周淋巴组织、视网膜组织、房水中IL-17、IL-4、IFN-r含量及表达变化，观察发病情况及疗效，并探讨其作用机制；建立tEAU模型，观察其对复发性动物模型的疗效，为临床推广应用奠定理论基础。

结论摘要：

目的研究清开灵组分的透过性和冰片对黄芩苷、栀子苷等的促渗作用和渗透机理。探讨清开灵注射液中的有效组分对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠Th1、Th17细胞的影响。探讨精简清开灵眼用原位凝胶的制备及其对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠的防治作用研究。探讨清开灵眼用凝胶对EAU大鼠的治疗作用及对其Th1、Th2、Th17及Treg细胞的影响。方法应用Franz扩散池和微透析技术，研究清开灵眼用凝胶中主要药效成分对离体角膜和在体角膜的透过性。采用流式细胞仪分析不同浓度的黄芩苷、栀子苷、胆酸、猪去氧胆酸对培养T细胞中CD4+，CD8+的百分比及CD4+/CD8+的比值的影响。应用酶联免疫吸附测定法测定各组大鼠T细胞培养上清IL-17，IFN-γ因子的浓度。对精简清开灵眼用原位凝胶进行系统质量控制评价，对药物动力学及药效学进行研究。结果空白滴眼液及含不同浓度冰片的栀子苷、黄芩苷的离体角膜累积透过量，明显促进它们的离体角膜透过，且与冰片含量成正比关系。与对照组相比，各组脾脏和淋巴结中CD4+百分比及CD4+/CD8+的比值明显降低；CD8+的百分比明显升高。各中间浓度作用下T细胞培养上清中IL-17和IFN-γ的浓度与对照组相比明显降低。稳定性试验及灭菌实验过程中药物组分含量稳定，无明显变化。精简清开灵眼用凝胶中四种主要药物组分的释放明显减慢，约在480min时，主要药物组分才得到充分的释放。清开灵眼用凝胶刺激性得分低于3.9分，表明其对眼局部均无刺激性。从大鼠眼部炎症表现所见，清开灵眼用凝胶可抑制大鼠葡萄膜炎的发病。病理检查所见，EAU模型组大鼠眼球外层视网膜广泛而重度的破坏，伴内层视网膜的部分破坏，并可见大量炎性细胞侵润。流式、ELISA与PCR结果表明清开灵眼用凝胶干预后自身免疫性葡萄膜炎大鼠体内的Th1、Th17的分化表达有很明显的降低，而作为保护性细胞因子的IL-4、IL-10的表达明显升高。结论冰片可提高药物通透性，可增加角膜通透率及生物利用度。黄芩苷、栀子苷、胆酸和猪去氧胆酸对EAU有明显治疗作用，为临床广泛应用奠定理论基础。精简清开灵眼用凝胶稳定性好、生物利用度高、安全性好。精简清开灵眼用凝胶四种主要药物成分组能有效地到达兔眼前房，为其防治葡萄膜炎提供了药代动力学基础。清开灵眼用凝胶对EAU有明显治疗作用，为临床广泛应用奠定理论基础。