中文摘要：

本课题组前期的研究结果发现miRNA-31表达与肺鳞癌预后相关，其表达越高预后越差，可能是肺鳞癌的发生和发展中一个重要的促癌基因。而且其靶基因也与肺癌预后相关。本课题将在肺鳞癌组织和细胞系中检测miRNA-31的表达水平，并研究其表达水平改变后对肺鳞癌细胞系增值、转移和侵袭等生物学行为的影响。并且在肺鳞癌细胞中深入研究miRNA-31对其靶基因的表达水平的调节，以及其靶基因介导miRNA-31促癌功能的作用机制。本课题对于揭示miRNA-31在肺癌发生发展中的作用机制具有重要的科学意义；对于最终将miRNA-31应用于肺鳞癌的临床诊断、预测转移风险以及可能进行的靶向治疗具有重要的意义。

结论摘要：

近30年来随着城市化和工业化的进步，肺癌已经成为全球范围内因癌症导致死亡的首要原因，约占总的恶性肿瘤死亡病例的30%。当前国际广泛采用的基于普通病理学的肺癌TNM分期系统存在许多缺陷，尤其是对于开展肺癌患者个体化的治疗及预后评估等发挥的作用极为有限。近几年越来越多的研究发现miRNA参与肿瘤发生发展、外侵转移和转归预后等多个环节，研究肺癌中miRNA表达谱及其与肺癌不同病理类型和预后转归的相关性，为临床更加科学的进行肺癌肿瘤分型、分期及预后判断提供了新的途径，发掘与肺癌相关的特异表达miRNA，对于肺癌的分型分期和预后判断具有重要的临床意义。课题申请者在前期的研究工作利用miRNA芯片对60例新鲜冰冻肺鳞癌与癌旁组织进行了杂交，建立了肺鳞癌特异的miRNA表达谱。发现miRNA-31在肺鳞癌中的表达发生了明显上调，其表达越高，预后越差，而且证实抑癌基因Dicer基因为其靶基因。说明miRNA-31在肺鳞癌的发生和发展中可能是一个重要的促癌基因，文章发表于2011年的Clinical Cancer Research杂志。本次研究microRNA-31在肺鳞癌细胞促癌机制，通过上调/下调其表达，检测对细胞生物功能生长及转移能力的影响。通过向细胞中转染microRNA-31模拟物mimics或者抑制物inhibitors，上调/下调microRNA-31的表达，继而用细胞生长曲线实验，及集落形成实验，检测对细胞增殖能力的影响；而通过transwell迁移和侵袭实验，检测对细胞转移能力的影响。发现转染microRNA-31 inhibitors进入肺鳞癌H520细胞中， 可以抑制细胞的增殖，抑制细胞克隆形成和裸鼠成瘤。同时，可以在体外减弱细胞的迁移和侵袭能力。而转染microRNA-31 mimies进入肺鳞癌细胞中，能促进细胞生长及集落形成能力增加。而且迁移和侵袭能力增强。microRNA-31能促进细胞生长及集落形成能力增加。而且迁移和侵袭能力增强。特别是裸鼠体内原代肺鳞癌组织移植成瘤，皮下注射hsa-miR-31抑制剂，抑制了肿瘤的生长，可以作为一期临床试验结果。通过肿瘤转移相关mRNA表达谱芯片杂交分析，建立了肺鳞癌细胞中miRNA-31的下游靶基因谱。microRNA-31有望成为肺鳞癌治疗的有意义的靶点。