本研究以我国重要的海水养殖动物- - 皱纹盘鲍为对象,探讨抗氧化功能的营养调控机制。筛选体内抗氧化敏感指标,克隆抗氧化系统中功能性酶类和非酶蛋白的基因序列,根据5'调控区的顺式元件设计反式因子,并培养肝细胞离体筛选。结合营养性和非营养性抗氧化剂,配制半精制人工饲料进行养殖实验。分析相关抗氧化非酶蛋白和酶类的活性和基因表达量,考察脂质过氧化、蛋白质氧化和DNA氧化损伤指标,确定在氧化胁迫型环境条件下(重金属、藻毒素和致病微生物等),能够有效调控体内氧化-抗氧化动态平衡的营养途径,提高皱纹盘鲍的抗氧化能力,促进体内重金属和藻毒素等有害物质的排出,保证其身体健康和作为人类重要水产品的食品安全。
本项目以皱纹盘鲍为研究对象,探讨抗氧化功能的营养调控机制,以及这种机制在氧化胁迫条件下维持体内氧化-抗氧化动态平衡的作用。筛选出皱纹盘鲍的抗氧化敏感指标包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和谷胱甘肽S转移酶(GST)等。同时,通过基因克隆和分析,以及营养条件对其转录水平的影响情况,确定了硒结合蛋白(SeBP)、热休克蛋白(HSP)和铁蛋白(HdhNFT)在皱纹盘鲍体内的抗氧化功能中起到了重要作用。在营养性的抗氧化剂研究方面证实,硒、锌、铁、维生素C和维生素K等营养素主要通过在转录水平上调节GPX、HSP、HdhNFT和SeBP的表达量来维持体内氧化-抗氧化的动态平衡;在非营养性的抗氧化剂研究方面表明,α-硫辛酸(LA)和还原型谷胱甘肽(GSH)在面临氧化胁迫时对机体有显著的保护作用,主要引起体内SOD、CAT、GPX、GST和丙二醛(MDA)的显著变化。维持体内最佳的抗氧化功能,饲料中LA的适宜添加量为709mg/kg,GSH的适宜范围为350-400 mg/kg,锌为33.85 mg/kg,铁为65.7mg/kg,硒为1.32 mg/kg,维生素C为70.3 mg/kg。研究还发现肝胰脏在维持皱纹盘鲍体内氧化-抗氧化动态平衡和解毒方面都起到关键作用,而硒和LA的协同效应对于机体的解毒功能起着重要作用。 本研究到目前为止共发表学术论文10篇,其中SCI收录8篇。