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芥菜AP1基因体外表达及其与FLC相互作用的验证
  • ISSN号:0496-3490
  • 期刊名称:作物学报
  • 时间:2012.5.5
  • 页码:1328-1333
  • 分类:Q75[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]西南大学园艺园林学院/南方山地园艺学教育部重点实验室/重庆市蔬菜学重点实验室,重庆400715
  • 相关基金:本研究由国家自然科学基金项目(31000908),中央高校基本科研业务费专项资金(XDJK2009C124,XDJK20128020),重庆市自然科学基金(2009BBl307,2011BAl002)和国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(2012CB1139000)资助.
  • 相关项目:决定芥菜开花信号整合子命运的两个反式元件相互作用及其特异性介导结构域鉴定
中文摘要:

芥菜花分生组织决定因子AP1与开花路径核心调节子FLC可能存在直接的相互作用,从而调节开花时间。为进一步检测该相互作用,从芥菜“QJ”材料中同源克隆了790bp的APlcDNA序列,该基因编码256个氨基酸。生物信息学分析表明,APl属MIKC型蛋白,其MADS域含有2个α螺旋和2个B折叠,第1个0c螺旋内含有1个不保守氨基酸位点;而K域含有3个仅螺旋,第1、2个0c螺旋内各有1个不保守位点,第3个0c螺旋内具有4个不保守位点。同时构建了原核表达质粒pET43.1a—APl,转化宿主菌大肠杆菌BL21,以IPTG诱导该融合蛋白体外表达。利用pET43.1a—APl融合蛋白序列中6xHis标签与Ni+结合的特点,结合SDS—PAGE分析,证实了体外表达蛋白APl能与FLC相互作用并形成复合体,该结果为深入研究AP1与FLC互作机制及花分生组织的分子调控奠定了基础。

英文摘要:

There exists a possible direct interaction between floral meristem factor AP1 and flowering pathway central regulator FLC in Brassica juncea Coss. To further prove the interactive mechanism between AP1 and FLC, the protein interaction in vitro was testified in Brassica juncea Coss. (Mustard). The cDNA of API gene isolated using homologous cloning techniques from mustard "QJ" was 790 bp, encoding 256 amino acids. AP1 belongs to MIKC type protein with MADS domain and K-box known from analysis software. The conserved MADS domain had two alpha helixes (ct) and two beta-sheets (~), and one amino acid site in the first tx helix was not conserved. The K-box had three alpha helixes (c0, and one amino acid site in the first and second tx helixes was not conserved, respectively, but four amino acid sites in the third tx helix were not conserved. Furthermore, recombi- nant plasmid pET43.1 a-AP1 was constructed, transformed to E. coli (BL21) and then induced protein expression by IPTG With the characteristics of 6xHis tag in fusion protein of pET43.1a-AP1 which could combine with Ni+, the interaction between AP1 and FLC was analyzed via SDS-PAGE. The results showed that AP1 and FLC could act with each other to combine and form a complex. This research provides theoretical and technical bases for further analyzing the interaction mechanism of AP1-FLC pro- tein complex and the molecular regulation of floral meristem in Brassicajuncea.

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期刊信息
  • 《作物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国作物学会 中国农业科学院作物科学研究所
  • 主编:万建民
  • 地址:北京海淀区中关村南大街12号中国农业科学院
  • 邮编:100081
  • 邮箱:zwxb301@caas.cn
  • 电话:010-82108548
  • 国际标准刊号:ISSN:0496-3490
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1809/S
  • 邮发代号:82-336
  • 获奖情况:
  • 2002年-第三届中国科协优秀科技期刊二等奖,2002-2009年-百种中国杰出学术期刊,2004年获“全国优秀期刊一等奖”,2005年获第三届国家期刊奖提名奖,2009年评为“2008年度中国精品科技期刊”,2009年被评为“新中国60年有影响力的期刊”,2011年获"第二届中国出版政府奖期刊奖提名奖"
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国食品科技文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:49369