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斜带石斑鱼IgZ重链基因的表达纯化和抗体制备
  • ISSN号:1004-874X
  • 期刊名称:广东农业科学
  • 时间:2013.5.1
  • 页码:149-152
  • 分类:Q812[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]暨南大学水生生物研究所/热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心/广东省高校水体富营养化与赤潮防治重点实验室,广东广州510632
  • 相关基金:国家自然科学基金广东省人民政府联合项目(U0631010);国家自然科学基金(40576056,40976066,31170474);广东省自然科学基金(04300664,07300378)
  • 相关项目:近江牡蛎潜在污染预警分子HSP70对污染物响应的信号持续性研究
中文摘要:

为获得斜带石斑鱼IgZ重链基因的多克隆抗体,成功构建了斜带石斑鱼免疫球蛋白IgZ重链重组蛋白表达质粒pQE30/IgZ,将其转化到大肠杆菌表达菌株M15中,确定了最佳诱导表达条件:IPTG0.2mmol/L,诱导温度30℃,诱导时间6h。所获得的IgZ重链重组蛋白经Ni-NTA亲和层析后,纯度达到85%1~上;以纯化的IgZ重链重组蛋白为抗原免疫新西兰兔,制备出相应的多克隆抗体,经ELISA测定抗血清效价约为1:320000。

英文摘要:

The recombinant expression plasmid was constructed by means of linking the grouper IgZ cDNA with prokaryotic expression vector pQE30. It was identified by endonuclease digestion and DNA sequencing of the recombinant plasmid. Then, the recombinant plasmid pQE30/IgZ was transformed into E. coli M15. And the most optimum induced expression conditions were determined: the IPTG was 0.2 mmol/L, the induced temperature was 30℃, the induction time was 6 h. The recombinant IgZ heavy-chain protein was gained by means of Ni-affinity chromatography. The purity of the recombinant IgZ heavy-chain protein was more than 85%. The anti-IgZ polyclonal antibody was gotten by means of immuning New Zealand white rabbit with the recombinant IgZ heavy chain protein. The result of Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) showed that the highest titer of anti-serum was 1:320 000 for IgZ.

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期刊信息
  • 《广东农业科学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:广东省农业科学院
  • 主办单位:广东省农业科学院 华南农业大学
  • 主编:
  • 地址:广州市天河区金颖路31号五山广东省农科院农经所
  • 邮编:510640
  • 邮箱:gdnykx@vip.163.com
  • 电话:020-38319948 38319941 38319942 38319946
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-874X
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1267/S
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 广东省第二、第三届优秀科技期刊,广东省首届十佳期刊,中国期刊方阵“双效”期刊,第四届全国农业优秀期刊一等奖,第五届全车优秀农业期刊鑫犁奖一等奖,首届全国CAD规范一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国动物学记录,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版)
  • 被引量:33995