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聚合酶链反应(PCR)的热性能对乙型肝炎病毒检测的影响
  • ISSN号:0253-231X
  • 期刊名称:《工程热物理学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q789[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]上海理工大学,上海200093, [2]淮海工学院,江苏连云港222005
  • 相关基金:国家自然科学基金(No.50676063);上海市重点学科(No.S30503)
中文摘要:

聚合酶链式反应(PCR)是由变性、退火及延伸三个步骤反复循环的DNA体外扩增技术。本文实验研究了PCR仪的三个阶段的热性能。结果显示,PCR实际温度与程序设置温度之间存在着较大的偏差;在变性阶段的温度差达3K以上;而且处于平台温度=±1℃范围内的时间也比设置的要短得多。本文同时用3.3kb(扩增区150bp)的乙型肝炎病毒(HBV-DNA)为试验材料(模板),实验研究了变性温度及变性时间对PCR扩增结果的影响。用电泳法分离PCR产物结果表明:当变性温度低于91℃,变性温度高于95℃,或者变性时间超过30s都会导致乙型肝炎病毒PCR检验结果的假阴性。

英文摘要:

By PCR (the polymerase chain reaction) technique, DNA is amplified in vitro by a serious of polymerization cycles. A PCR cycle consists of three thermal steps: denaturation, annealing and extension. The experiment shows that there is quite large deviation between the program step and the actual step. The temperature deviation during the denaturation is larger than 3 K; the running time at the plateau at the temperature of 90℃±1℃ is quite short. At the same time, HBV-DNA is selected as a template, and the impact of the denaturation temperatures and the denaturation time of PCR procedure is studied. The products are tested by the electrophoresis. False negative may be produced if the denaturation temperature is lower than 91℃ or higher than 95℃, or the denaturration time is longer than 30 s.

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期刊信息
  • 《工程热物理学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国工程热物理学会 中国科学院工程热物理研究所
  • 主编:徐建中
  • 地址:北京2706信箱
  • 邮编:100080
  • 邮箱:xb@mail.etp.ac.cn
  • 电话:010-62584937
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-231X
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2091/O4
  • 邮发代号:2-185
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:21026