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鹅源新城疫病毒拯救体系的建立
  • ISSN号:0253-2654
  • 期刊名称:微生物学通报
  • 时间:0
  • 页码:426-429
  • 语言:中文
  • 分类:Q93[生物学—微生物学]
  • 作者机构:[1]扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室,扬州225009
  • 相关基金:国家自然科学基金重点项目(No.30630048);国家科技支撑计划(No.2006BAD06A03)
  • 相关项目:新城疫病毒跨种间感染与传播机制研究
中文摘要:

参照GenBank上公布的鹅源新城疫病毒ZJI株全序列,设计8对引物,经RT-PCR法从尿囊液中扩增目的片段后,分别克隆进pCR2.1载体,将Ⅰ~Ⅶ7对引物的扩增片段依次亚克隆到TVT7R转录载体中,构建了含NDV全基因组cDNA的转录载体(pNDVZJI),将Ⅴ、Ⅵ和Ⅷ3对引物的扩增片段分别克隆进pCR2.1载体,并亚克隆到表达质粒pCI-neo上,构建了L基因的真核表达载体(pCI-L),pNDVZJI、pCI-L与另外两个辅助表达质粒(pCI-NP和pCI-P)共转染BSR-T7/5细胞,成功拯救出了具有血凝性的鹅源新城疫病毒,ZJI株鹅源新城疫病毒的成功拯救为后续相关研究工作的开展打下了基础。

英文摘要:

Eight fragments were amplified and cloned into pCR2.1 vector with the designed primers. The fragments, amplified with primer Ⅰ to Ⅶ, were subcloned into transcription vector to construct the plasmid pNDVZJI which contained the full-length cDNA of NDV ZJI strain. The eukaryotic expression vector pCI-L was constructed by subcloning the fragments, amplified with the primer Ⅴ, Ⅵ and Ⅶ, into the expression vector pCI-neo. The full-length cDNA clone, pNDVZJI, with three helper plasmids, pCI-NP,pCI-P and pCI-L, were cotranfected into BSR-T7/5 cell expressing T7 RNA polymerase. After inoculation of transfected cell culture into embryonated chicken eggs from specific pathogen free(SPF) flock, The NDV of ZJI strain was rescued successfully, which laid a good foundation for the further related research.

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期刊信息
  • 《微生物学通报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院微生物研究所 中国微生物学会
  • 主编:赫荣乔
  • 地址:北京市朝阳区北辰西路一号院3号中国科学院微生物研究所内B401室
  • 邮编:100101
  • 邮箱:xuj@sun.im.ac.cn
  • 电话:010-64807511
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-2654
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1996/Q
  • 邮发代号:2-817
  • 获奖情况:
  • 1992年中国科学技术协会优秀学术期刊三等奖,1992年国家科委中共中央宣传部新闻出版署“全国优...,2000年中国科学院优秀期刊三等奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:29487