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实时荧光定量RT-PCR方法检测禽流感病毒
  • ISSN号:1005-4545
  • 期刊名称:《中国兽医学报》
  • 时间:0
  • 分类:S852.65[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]扬州大学兽医学院畜禽传染病农业部重点开放性实验室,江苏扬州225009
  • 相关基金:国家自然科学基金重点资助项目(30630048)
中文摘要:

根据禽流感病毒(Avianinfluenza virus,AIV)M基因上的保守序列,合成引物和荧光标记探针,以阳性AIVM基因质粒为标准品做标准曲线,建立了荧光定量逆转录聚合酶链反应(RRT-PCR)检测方法。结果表明,本试验建立的标准曲线循环阈值(Ct值)与模板浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.999,灵敏度约为5拷贝/μL,相当于5个AIV颗粒,对新城疫病毒和其他禽病病毒无交叉反应,特异性好、重复性佳,为AIV检测提供了一种特异、敏感、快速的定量检测方法。对500份临床泄殖腔棉拭样品的检测,其结果阳性、阴性数与经典病毒分离方法符合率分别为91.2%、99.4%。在AIV临床样品筛检、流行病学监测等方面显示良好的应用前景。

英文摘要:

According to the conservative region of AIV M gene, the primers and fluorescent probe were synthesized. A serial 10 fold dilutions positive plasmid was prepared and used for standard. The standard curve revealed the linear relationship between CT (cycle threshold) and template concentration. The RRT-PCR method for the detection of AIV was highly specific and sensitive and could be used for a rapid quantitative detection of AIV. No cross-reaction was detected against other avian disease viruses. Sensitivity was 5 copies of AIV genome. The meet rate of positive sum and negative sum with traditional virus isolation method was 91.2% as well as 99.4% in detecting 500 clinical cloacal swab samples,respectively.

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期刊信息
  • 《中国兽医学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:吉林大学
  • 主编:王哲
  • 地址:吉林省长春市西安大路5333号
  • 邮编:130062
  • 邮箱:xbcjvs@163.com
  • 电话:0431-87836531 87836534
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-4545
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1234/R
  • 邮发代号:12-105
  • 获奖情况:
  • 第二届全国优秀科技期刊评比二等奖,连续多次被评为全军优秀医学期刊一等奖,全国高校优秀自然科学学报评比一等奖,中国期刊方阵“双百”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18973