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抗hARD1抗血清制备及其初步肿瘤免疫组化分析
  • ISSN号:1000-3061
  • 期刊名称:《生物工程学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q786[生物学—分子生物学] S432.41[农业科学—植物病理学;农业科学—农业昆虫与害虫防治;农业科学—植物保护]
  • 作者机构:[1]云南大学生命科学学院生物化学与分子生物学实验室,昆明650091, [2]云南省第一人民医院病理科,昆明650032
  • 相关基金:国家自然科学基金(Nos.30360040,30760057),云南省科技厅攻关项目(No.2006SG09)资助.致谢:本研究工作中,云南大学单克隆抗体研究中心在抗血清制备方面提供了技术方面的帮助:云南省第一人民医院病理科李琳主任在病理样本的鉴定方面作了大量工作,孙桂林进行了细胞培养工作;蒋琳在抗血清制备方面给予了帮助;云南师范大学附属中学吴松镝同学参与了本研究工作,在此一并表示感谢!
中文摘要:

人ARD1(human arrest defective 1,hARD1)基因被确定具有N-乙酰基转移酶活性,但其生理学功能并不清楚。为了探讨hARD1基因与肿瘤的关系,检测hARD1蛋白在不同肿瘤中的表达,克隆了hARD1基因并进行原核表达,利用镍离子螯合(His.bind)柱层析纯化,得到纯度达95%以上的hARD1蛋白。以纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备了抗hARD1蛋白的抗血清。利用抗hARD1多抗血清检测常见的临床肿瘤病理组织,发现hARD1蛋白在乳腺肿瘤、前列腺癌,以及肺癌中有较高频率的表达,其中乳腺肿瘤中的表达频率最高,达到70%,远高于其他肿瘤组织。表明hARD1蛋白的高表达可能是乳腺肿瘤组织的一个标志,为进一步揭示hARD1与乳腺肿瘤的关系奠定了基础。

英文摘要:

Human arrest defective 1(hARD1) is an acetyltransferase; its physiological significance remains unclear. To explore the relationship between ARD1 protein and tumors, we detected the hARD1 protein in tumor tissues in vivo. We cloned hARD1 gene from Hela cell and construct recombinant plasmid pET28b-hARD1. The recombinant plasmid was transformed into E. coli BL21(DE3)plysS. hARD1 protein was expressed by inducing with IPTG(1 mmol/L) and purified up to 95% through Ni2+ chelation affinity chromatography. We used the purified hARD1 protein as antigen immunized the Balb/c mice and obtained the hARD1 specific polyclonal antiserum. Through immunohistochemical analysis of different tumor tissues in vivo, we found that hARD1 expressed at high frequency in breast cancer, prostate cancer and lung cancer, especially, hARD1 expression frequency in breast cancer was up to 70%, which is higher than in the other tumors. These results indicate that the high expression level of hARD1 could be an indicator of the breast cancer. This new finding would be a foundation to further explore the relationship between breast tumor and hARD 1.

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期刊信息
  • 《生物工程学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院微生物研究所 中国微生物学会
  • 主编:杨胜利
  • 地址:北京市朝阳区大屯路中国科学院微生物研究所内B401室
  • 邮编:100101
  • 邮箱:cjb@im.ac.cn
  • 电话:010-64807509
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-3061
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1998/Q
  • 邮发代号:82-13
  • 获奖情况:
  • 北京市优秀科技期刊期刊奖,中国科协首届优秀学术期刊奖,2000年中科院优秀科技期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18441