人线粒体转录终止因子样基因是本项目组发现的一个新的细胞生长相关基因,已有的研究表明该基因与现有的海胆线粒体转录终止因子序列的同源性达到29%,与人的线粒体转录终止因子的DNA结合结构域有相同的结构域,荧光定位也表明其蛋白产物定位在培养的Hale细胞的线粒体中。该基因在细胞血清饥饿后,恢复血清培养的30分钟和12小时时表达水平短时间的降低,细胞转基因结果显示该基因对细胞生长有抑制作用。本项目将在已有的研究基础上,通过线粒体显色技术对蛋白在线粒体上进行更精确定位,通过蛋白的DNA结合实验研究蛋白的DNA结合序列;通过转基因后的细胞行为和基因表达谱的变化,明确该基因在线粒体功能和细胞周期中的作用和机制;通过体外表达,制备抗体,进行培养细胞、肿瘤组织中的表达分析,以确定基因在细胞增殖,肿瘤发生中的作用。本研究对细胞周期调控中的作用机制以及肿瘤发病机制和诊断研究有重要意义。
线粒体转录终止因子(mTERF)是一个控制线粒体基因转录的调控因子。它结合于线粒体DNA的16srRNA和亮氨酸tRNA基因的分界处。它一方面控制线粒体重链和轻链转录到16srRNA基因或亮氨酸tRNA基因时停止,另一方面将加强重链基因的转录水平。这样的效果使得12srRNA和16srRNA基因的表达水平高于下游基因的表达水平达20-50倍。本项目研究的线粒体转录终止因子样蛋白(mTERFL)是本研究小组新发现的一个基因,其蛋白与线粒体转录终止因子有相似的结构域,同时是一个血清饥饿时高表达的基因(因此最初被命名为Si-2基因)。这表明该基因是一个联系细胞生长与线粒体基因转录控制关系的基因。本项目对该基因与线粒体的关系及其与细胞生长控制的关系进行研究。通过3年的实施,取得了如下的研究结果1.确定了该基因的蛋白表达产物定位在线粒体上,这一点与预计的一致;2.明确了该基因是一个抑制细胞生长的基因;3.初步确定该基因的蛋白产物可能结合于12srRNA和16srRNA基因之间,导致16srRNA表达水平下降。本研究初步揭示了线粒体基因转录控制与细胞生长的关系。