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兔房水HPCE检测及其对培养角膜基质细胞的作用
  • ISSN号:1000-9965
  • 期刊名称:暨南大学学报
  • 时间:0
  • 页码:374-377
  • 分类:R331[医药卫生—人体生理学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]暨南大学医学院眼科研究室,广东广州510632, [2]暨南大学再生医学教育部重点实验室,广东广州510632, [3]暨南大学医学院口腔医学系,广东广州510632, [4]暨南大学医学院临床医学系,广东广州510632
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30371519 30973244)(致谢:感谢暨南大学生命科学技术学院分析测试中心梁志红高级工程师对实验技术的支持和帮助.)
  • 相关项目:微重力介导角膜基质细胞的iPS诱导及其角膜内皮细胞分化
中文摘要:

目的:采用高效毛细管电泳(HPCE)的毛细管区带电泳(CZE)分离与检测兔房水中各蛋白组成,观察房水对培养角膜基质细胞的作用。方法:CZE测定新西兰白兔房水蛋白成分:运行缓冲液硼酸钠-硼酸缓冲溶液(pH=8.7、9.1、9.4);毛细管柱温20℃;检测波长200 nm;压力进样0.5 psi,进样时间10s;运行电压20 kV。第1代培养角膜基质细胞进行DMEM/F12培养,加入体积分数为10%的房水,CCK-8检测24 h后细胞增殖情况,每天倒置显微镜下观察细胞生长情况。结果:应用pH=9.4的硼酸钠-硼酸缓冲溶液可获得分离效果较理想的兔房水毛细管电泳峰图。加入房水24 h后CCK8检测吸光度增高(P〈0.05),角膜基质细胞生长良好。结论:HPCE可快速有效方便检测兔房水蛋白成分,体积分数为10%的兔房水可促进培养的兔角膜基质细胞生长与增殖。

英文摘要:

Aim:To detect the protein constitutes of rabbit aqueous humor with capillary zone electrophoresis(CZE) of high performance capillary electrophoresis(HPCE) and the effect of aqueous humor on the growth of keratocytes. Methods: Samples of rabbit aqueous humors were analyzed using CZE.The running buffers were borate-borax(pH=8.7,9.1 and 9.4).Sample application was 10s,applied voltage 20kV,detection at 200nm,sample pressure was 0.5psi and column temperature was maintained at constant 20°C.Rabbit keratocytes were cultured in vitro and 10% rabbit aqueous humors were added in the culture medium DMEM/F12.The cell proliferations after 24 hours were examined by the CCK-8 assay.Phase contrast microscope examination was performed daily.Results: A number of resolved peaks were obtained from aqueous humor of rabbit in running buffers of borate-borax(pH= 9.4).The absorbance values of the CCK8 assay for supplementary aqueous humors after 24 hours were significantly high(P0.05).Rabbit keratocytes grew well.Conclusion:CZE is rapid,effective and convenient for the detection of the protein constitutes of rabbit aqueous humor.10% aqueous humors promote the growth and proliferation of keratocytes.

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期刊信息
  • 《暨南大学学报:自然科学与医学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:广东省教育厅
  • 主办单位:暨南大学
  • 主编:刘颖
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  • 国际标准刊号:ISSN:1000-9965
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1282/N
  • 邮发代号:46-257
  • 获奖情况:
  • 2009年全国高校科技期刊优秀编辑质量奖,2010年获教育部科技司颁发“第三届中国高校优秀期...,2011年获广东省科学技术厅“第四届广东省优秀科技...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
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