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中文摘要：
目的：用基因工程的方法克隆表达丙酮酸脱氢酶复合体E2（PDC-E2）融合蛋白,以用于人原发性胆汁性肝硬化（PBC）的早期发现和临床诊断.方法：针对PDC-E2的cDNA序列设计引物,从正常人的淋巴细胞中提取RNA,通过反转录PCR方法扩增得到相应的基因片段,经测定序列验证后插入表达载体pET28a（＋）,构建重组表达载体pET28a（＋）-PDC-E2,转化大肠杆菌BL21（DE3）后诱导表达蛋白质.表达蛋白经SDS-PAGE、Western blot鉴定.结果：经核苷酸序列测定和酶切鉴定结果表明,成功地构建了PDC-E2重组质粒.IPTG诱导表达后,获得PDC-E2融合蛋白.经免疫学鉴定,重组抗原片段具有抗线粒体抗体二亚型（AMA-M2）的免疫原性.结论：获得PBC特异性靶抗原的多肽片段,为PBC的早期发现和临床诊断提供有力工具.
英文摘要：
Objective：To express PDC-E2 recombinant fusion protein in E. coli. Methods：The cDNA encoding PDC-E2 was obtained by RT-PCR, confirmed by DNA sequencing, subcloned indirectionally into the bacterial expression plasmid pET28a（ ＋ ） and then transformed into E. coil. BL21 （ DE3 ） to express the recombinant fusion protein induced by IPTG. Results：The recombinant fusion protein exhibited the antigenicity of AMA-M2 by Western blot. Conclusion ：The PDC-E2 recombinant fusion protein could be used for diagnosing PBC.
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