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结核杆菌抗原多表位融合蛋白的重组表达与鉴定
  • ISSN号:0258-879X
  • 期刊名称:《第二军医大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:R52[医药卫生—临床医学;医药卫生—内科学]
  • 作者机构:[1]第二军医大学长征医院实验诊断科、解放军临床免疫中心,上海200003
  • 相关基金:国家自然科学基金(30471616);上海市重点基础科研项目(05JC14052);上海市重点科研支撑条件项目(051409012);上海市青年科技启明星计划(QMX01423).
中文摘要:

目的:构建含有6个编码结核杆菌抗原HLA—A*0201限制性CD8+CTL表位基因序列的重组质粒,并在大肠杆菌中诱导表达。方法:选取结核杆菌抗原Rv0309、Rv0173、Ag85A、Ag85C的6个HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,引入Th表位PADRE及木马肽序列,并以RVKR序列作为接头,合成全基因序列,经PCR扩增后插入融合表达载体pGEX-4T-1,将重组质粒转入大肠杆菌BL21并以IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western印迹鉴定重组表达蛋白。结果:成功构建了结核杆菌多表位蛋白的表达质粒,并经IPTG诱导表达了大小约为40000的融合蛋白。结论:多表位融合蛋白的重组表达为进一步开发新型结核疫苗打下了基础。

英文摘要:

Objective: To construct a recombinant multiepitope fusion polypeptide containing 6 HLA-A * 0201 restricted CTL epitopes derived from Mycobacterium tuberculosis(Mtb. ) antigens and express it in E. coll. Methods: The full-length sequence encoding 6 HLA-A* 0201 restricted CTL epitopes were derived from Mtb. antigens Rv0309, Rv0173, and Ag85A, Ag85C; pan DR Th epitope (PADRE), Trojan peptide, and furin-sensitive linker RVKR were synthesized, amplified by polymerase chain reaction(PCR), inserted into the expression vector pGEX-4T-1, and transformed into E. coli BL21 (DE3). After induced by isopropyhhio-β-D-galactoside (IPTG), the recombinant protein expression was examined by SDS-PAGE and Western blot. Results: The recombinant multiepitope fusion polypeptide plasmid was successfully constructed and expressed(about 40 000) in E. coli BL21 (DE3). C.ondusion.. The recombinant multiepitope fusion polypeptide may provide a basis for developing novel TB vaccine.

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期刊信息
  • 《第二军医大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:第二军医大学
  • 主办单位:第二军医大学
  • 主编:吴孟超
  • 地址:上海市翔殷路800号
  • 邮编:200433
  • 邮箱:bxue@smmu.edu.cn
  • 电话:021-81870791
  • 国际标准刊号:ISSN:0258-879X
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1001/R
  • 邮发代号:4-373
  • 获奖情况:
  • 2008年被评为首批"中国精品科技期刊"2008年获第二...,2004年获第四届全军医学期刊质量评比优秀奖,2002年获第二届国家期刊奖百种重点期刊奖,2000年获首届《CAJ-CD规范》执行评优活动执行优秀奖,1999年获上海高校优秀自然科学学报评比一等奖,1999年获全国高校自然科学学报及教育部优秀科技期...,1997年获上海科技期刊评比二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:30859