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连翘ISSR-PCR反应体系的建立及优化
  • ISSN号:1673-923X
  • 期刊名称:《中南林业科技大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:S718.46[农业科学—林学]
  • 作者机构:[1]中南林业科技大学,湖南长沙410004, [2]河南省林业科学研究院,河南郑州450008
  • 相关基金:国家林业公益性行业科研专项(编号:200904024):河南省博士后科研资助(编号:2011044)
中文摘要:

通过正交设计的方法优化连翘ISSR-PCR反应体系,PCR结果用MINITAB16数据处理软件分析,建立了适用于连翘ISSR反应的最适反应体系(25μL):TaqDNA聚合酶1.2U、Mg^2+浓度1.5mmol·L^-1、模板DNA20~80ng、dNTPs0.3mmol·L^-1、引物0.3μmol·L^-1。进行了梯度退火试验,得到连翘ISSR-PCR反应体系最佳退火温度为55℃。

英文摘要:

The ISSR-PCR amplification system of Forsythia suspensa was optimized by using orthogonal design method with five factors (Taq DNA polymerase, Mg^2+, DNA template, dNTPs and primer) and four levels respectively. The results of PCR was analyzed by software MINITAB. A suitable ISSR reaction system was established. It is 25 μL reaction system, containing 1.2 U Taq DNA polymerase, 1.5 m mol·L^-1 Mg^2+, 20-80 ng DNA template, 0.3 m mol·L^-1 dNTPs and 0.3 μmol·L^-1 primer. Through the gradient PCR test, the optimal annealing temperature for ISSR-PCR reaction turned out to be 55 ℃.

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期刊信息
  • 《中南林业科技大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:湖南省教育厅
  • 主办单位:中南林业科技大学
  • 主编:赵运林
  • 地址:湖南长沙市韶山南路498号
  • 邮编:410004
  • 邮箱:xb-csfu@163.com
  • 电话:0731-85623395 85623278
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-923X
  • 国内统一刊号:ISSN:43-1470/S
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 1999年被评为全国高优秀学报二等奖,湖南省高校优秀学报一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:11201