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GRIM-19原核表达载体的构建及GST-GRIM-19的诱导表达与纯化
  • ISSN号:1000-1492
  • 期刊名称:安徽医科大学学报
  • 时间:2011
  • 页码:493-496
  • 分类:R394.3[医药卫生—医学遗传学;医药卫生—基础医学] R341[医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]安徽医科大学附属省立医院妇产科分子实验室,合肥230001
  • 相关基金:连胜自然科学基金(编号:81001168.81072127);安徽省自然科学基金(编号:090413117);安徽省高等学校省级自然科学研究项目(编号:KJ2010B375)
  • 相关项目:GRIM-19靶向抑制子宫颈癌细胞p53蛋白降解作用的机制研究
中文摘要:

目的构建GRIM-19原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化GST-GRIM-19融合蛋白。方法用RT-PCR法从HeLa细胞中扩增出含BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的GRIM-19基因片段,将其克隆至pGEX-4T-3原核表达载体上,在大肠杆菌中诱导表达GST-GRIM-19融合蛋白,用Glu-tathione Sepharose 4B纯化,纯化后蛋白经Western blot鉴定。结果构建pGEX-4T-3-GRIM-19原核表达载体成功,表达的GST-GRIM-19融合蛋白相对分子质量约45 ku,浓度0.1mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导2 h,并成功纯化到融合蛋白。结论成功构建GRIM-19原核表达载体,诱导表达并纯化GST-GRIM-19融合蛋白。

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期刊信息
  • 《安徽医科大学学报》
  • 中国科技核心期刊
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  • 主办单位:安徽医科大学
  • 主编:曹云霞
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  • 邮编:230032
  • 邮箱:aydxb@vip.163.com
  • 电话:0551-65161103
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-1492
  • 国内统一刊号:ISSN:34-1065/R
  • 邮发代号:26-36
  • 获奖情况:
  • 安徽省高等院校优秀学报(1995、1999、2009、2013年),安徽省优秀科技期刊(1990、1998、2002、2005年),全国优秀高等学校自然科学学报(1999、2002-2005年),教育部优秀科技期刊(2002-2005年),华东地区优秀期刊(2013年),RCCSE核心期刊排行榜A类期刊(2009、2011、2015-2...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:17972