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从大白芸豆种子中分离与表征一种新型凝集素WKBL
  • ISSN号:1007-7626
  • 期刊名称:中国生物化学与分子生物学报
  • 时间:2012
  • 页码:637-644
  • 分类:Q51[生物学—生物化学]
  • 作者机构:[1]福州大学生物科学与工程学院,福州350002
  • 相关基金:国家自然科学基金(No.31071498); 福建省新世纪优秀人才支持计划(No.JA10012)
  • 相关项目:食品源抗冻多肽的制备及冰晶抑制作用研究
中文摘要:

从大白芸豆种子中,经过缓冲液抽提、硫酸铵沉降、蓝胶亲和色谱(AF-Blue HC-650M)、离子交换色谱(CM-Sephadex C-25)、凝胶过滤色谱(Sephadex G-50)等步骤,分离纯化了一种具有一定抗真菌活性和抗肿瘤活性的凝集素,命名为WKBL.经SDS-PAGE显示,WKBL分子量为25 kD,N端序列为DAVLYRGPGDLHTGS,过碘酸-雪夫染色(PAS)呈红色.凝血活性实验显示,WKBL凝血效果明显,但只有在60℃以下才具有凝血活性,而pH对其活性影响并不大.D-半乳糖、D-果糖、D-葡萄糖、甘露醇能抑制WKBL的活性.WKBL为金属依赖型凝集素,LiCl、SnCl2和K2Cr2O7能抑制WKBL活性,但CaCl2、BaCl2、ZnCl2、CuCl2、FeCl3和MgCl2对WKBL活性却无影响.WKBL对白血病细胞K562的生长显示出较强的抑制作用,其IC50为15μmol/L,对HeLa细胞呈现抑制作用,对HepG2细胞的抑制作用不明显.抑菌实验显示,WKBL对瓜果腐霉病菌(Pythiumaphanidermatum)、苹果轮纹病菌(Physalospora piricola)、甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.nelonis)和葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)呈现出一定的抑制,但是其抑制率对浓度的依赖性并不高.

英文摘要:

A novel lectin with the molecular mass of 25 kD,designated WKBL,was isolated from seeds of white kidney beans.The purification steps involved ammonium sulfate precipitation,affi-gel blue chromatography,ion-exchange chromatography on CM-Sephadex C-25,gel filtration chromatography on Sephadex G-50.The lectin could be stained in red by periodic acid-Schiff(PAS) reagent and its N-terminal sequence was DAVLYRGPGDLHTGS.WKBL exhibited hemagglutinating activity in human erythrocytes.The hemagglutinating activity was mostly preserved up to 60℃.WKBL was stable over the pH 2~11.Among the carbohydrates tested,D-galactose,D-fructose,D-glucose,and mannitol were capable of inhibiting the hemagglutinating activity.WKBL was a metal dependent protein;the metallic compounds including LiCl,SnCl2 and K2Cr2O7 inhibited the activity whereas MgCl2,ZnCl2,BaCl2,CuCl2,FeCl3 and CaCl2 did not affect its activity.Proliferation of tumor cells K562 cells was inhibited strongly by WKBL with an IC50 of 15 μmol/L,whereas its inhibit is weaker to HeLa cells and slightly affected to HepG2.WKBL showed antifungal activity towards the growth of Pythium aphanidermatum,Physalospora piricola,Fusarium oxysporum f.sp.nelonis,Botrytis cinerea,but the inhibition rate was not dependent strongly on the concentration of WKBL.

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期刊信息
  • 《中国生物化学与分子生物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国生物化学与分子生物学会 北京大学
  • 主编:周春燕
  • 地址:北京市学院路38号北京大学医学部
  • 邮编:100083
  • 邮箱:shxb@bjmu.edu.cn
  • 电话:010-82801416
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-7626
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3870/Q
  • 邮发代号:82-312
  • 获奖情况:
  • 被美国《CA》列入世界引用频次最高的《千种表》
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:9731