HBx的致癌作用机理目前仍不十分清楚。本项目研究通过基因转染技术将克隆有乙肝病毒X基因和survivin基因的质粒分别和共同导入培养的人肝细胞系L-O2和鼠纤维母细胞系NIH3T3中,获得了稳定细胞系。L-O2-X和L-O2-X-S细胞中有甲胎蛋白的表达,初步显示这些细胞发生了转化。对癌蛋白的检测发现,L-O2-X-S/3T3-X-S具有转化细胞的特征。L-O2-X-S细胞克隆形成能力显著增强。接种裸鼠后,L-O2-X细胞接种的裸鼠8只中有3只成瘤;L-O2-X-S细胞接种的裸鼠8只全部成瘤。应用免疫共沉淀、RNA干扰和激光共聚焦实验方法,发现HBx、survivin和HBXIP三者能相互结合,HBx和survivin的结合通过HBXIP来实现。我们发现在转化过程中HBx起主要作用。survivin在HBx的致癌作用中发挥了重要功能。当HBXIP被RNA干扰后,三者复合物不能形成,转化作用不能发生。转化过程中,microRNA hsa-miR-520b表达水平下调,其靶基因HBXIP表达上调从而适应体内HBx和survivin的表达水平,形成三者复合物。本研究共发表SCI论文10篇。
英文主题词HBx;survivin;HBXIP;transformation; synergy