干细胞治疗肿瘤具有重要的应用前景,申请者已通过动物、细胞和分子水平的实验发现,间充质干细胞及其条件培养液具有直接抑制肿瘤细胞生长的作用。为了进一步揭示其作用的分子机理,申请者提出"干细胞可通过表达的DKK抑制肿瘤细胞中Wnt信号途径,从而抑制肿瘤细胞增殖"的假说,本项目拟从Wnt信号传导途径进行深入研究。研究中将采用DKK真核表达载体进行基因转染肿瘤细胞,使肿瘤细胞过表达DKK;并构建DKK的RNA干扰载体,采用RNA干扰方法,降低干细胞中DKK的表达水平;通过剂量依赖和时间依赖,观察干细胞条件培养液对肿瘤细胞β-catenin、c-Myc的影响。应用抗DKK抗体中和干细胞条件培养液中DKK因子,然后应用流式细胞仪观察干细胞对肿瘤细胞的抑制作用。本研究通过阐明Wnt信号传导途径在干细胞抑制肿瘤细胞中的作用及其分子机理,将为今后应用干细胞治疗肿瘤提供实验依据和奠定理论基础。