以文冠果雄花选择性败育前夕的雌蕊和两性花中正常发育的同期雌蕊为研究材料,采用Genefishing技术首次筛选到21个差异表达的cDNA片段(DEGs),选取4个DEGs登录了NCBI EST库。根据反向Northern杂交和半定量RT-PCR,选择出9个重要的DEGs,表明它们中的部分在雄花和两性花的雌蕊中表达有差异。用3'race和5'race技术克隆获得文冠果ubl5全长基因。该基因开放阅读框(ORF)编码73个氨基酸。UBL5蛋白在种系发育过程中大量的表达并高度保守,可能通过调节细胞周期蛋白酶CLK4来调节雄花雌蕊大孢子母细胞的分裂行为。采用石蜡制片技术,确定文冠果雄花雌蕊的选择性败育发生在大孢子母细胞减数分裂Ⅰ期。通过雄花和两性花三个时期的雌蕊全蛋白质电泳图谱分析,找到可能与雄花雌蕊选择性败育相关的三个特异蛋白点A1、A2、B5,并对其进行质谱等分析,其产物可能参与雌性不育过程中蛋白质的水解和细胞程序性死亡等过程。利用气-质谱(GC-MS)联用技术对文冠果雄花和两性花四个时期雌蕊中的GA3、ABA二种内源激素进行测定,表明它们的含量变化与文冠果选择败育有密切的关系。
英文主题词Xanthoceras sorbifolia Bunge; pistil selective abortion; gene clone; special protein; endogenous hormone