Borna病病毒(BDV)是一种嗜神经病毒,可导致动物的脑脊髓炎即Borna病(BD)。目前研究对BDV感染是否肯定与人类神经疾病的发病相关尚未确定。本研究拟以巢式逆转录PCR(nRT-PCR)结合荧光定量PCR(FQ-PCR)法对贵州省不同地区病毒感染相关的部分神经疾病(病因未明的脑炎、脱髓鞘疾病等)患者和健康人群(血液、CSF)、动物(马、牛、羊等血液和脑组织)中BDV p24及p40基因片段进行检测;Western blot 检测CSF和血浆中的BDV抗体;三联ELISA检测CSF和血浆中BDV抗原;病毒基因序列的比较分析及病毒分离等;同时总结BDV感染的神经疾病的临床特征及流行病学特点。进一步确定BDV感染与神经疾病发病的相关性,确立BDV感染的人类疾病模型。本研究将为某些相关的神经系统感染性疾病的诊断和治疗提供新的理论依据,为BDV感染的深入研究和预防控制打下基础。
Borna diease virus;FQ-nRT-PCR;Western blot;ELISA;Molecular epidemiology
Borna病病毒(BDV)是一种嗜神经病毒,可导致动物的脑脊髓炎即Borna病(BD)。目前研究对BDV感染是否肯定与人类神经疾病的发病相关尚未确定。采用蛋白免疫印迹(Western blot)方法在中枢神经系统疾病(病毒性脑炎、多发性硬化、吉兰-巴雷综合征以及帕金森病)患者的外周血中成功的检测到BDV特异性抗体。在120例外周血中BDV-p24抗体阳性标本7例,阳性检出率为5.83%(7/120),BDV-p40阳性标本8例,阳性检出率为6.7%(8/120);应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法在神经疾病患者的脑脊液以及外周血中成功检测到BDV-CIC和BDV特异性抗体,在84例脑脊液中BDV-CIC阳性标本13例(阳性检出率为15.48%,13/84)而13例BDV-CIC阳性标本中只有1例BDV抗体阳性(1/13),88例外周血中BDV-CIC阳性标本为11例(阳性率检出为12.5%,11/88),而11例BDV-CIC阳性标本中有6例BDV抗体阳性(6/11),应用FQ-nRT-PCR在神经系统疾病患者的外周血、脑脊液中以及在动物外周血、脑组织中(蝙蝠)检测到BDV-p24以及BDV-p40基因片段,在55例神经系统疾病患者外周血中BDV-p40基因片段阳性标本有5例(阳性检出率9.09%,5/55),在54例神经系统疾病患者脑脊液中BDV-p40基因片段阳性标本有6例(阳性检出率为11.1%,6/54),在82例蝙蝠脑组织中BDV-p24基因片段和磷蛋白抗原阳性检出率分别为6.1%(5/82)、11%(9/82),在82例蝙蝠脑组织中BDV-p40基因片段和核蛋白抗原阳性检出率均为12.2%(10/82),并且建立了BDV新的实验检测方法,并总结神经系统疾病患者中Borna病毒的感染率以及分布情况。在研究期间共发表论文17篇,其中包括1篇SCI期刊,8篇中文核心期刊,8篇中文一般刊物。本研究主要以贵州及周边地区的神经系统疾病患者和动物(蝙蝠)为主要研究对象,为某些相关的神经系统感染性疾病的诊断和治疗提供新的理论依据,结合前期相关课题结果(贵州及周边地区120例牛中有5例BDV-p24基因片段阳性,300例羊中有2例BDV-p24基因片段阳性)也丰富了Borna病毒在贵州流行病学的特点,为贵州省及周边地区的BDV感染的深入研究和预防、控制奠定基础。