在克隆小鼠NRE基因及其2个剪接变异体的基础上,通过本项目研究发现(1)mNRE具有一个N-端跨膜结构域(TM)、一个调节域(R)和催化结构域(C)。酯酶分析显示TM和R结构域并不是其催化活性所必需的,然而TM对其活力影响较大。mNRE通过其TM镶嵌于内质网膜上, mNRE大部分结构暴露在内质网膜上的细胞质侧面。(2)mNRE通过自噬和蛋白酶体途径被降解,其TM和R结构域分别在2条降解途径中其一定作用。(3)mNRE剪接变异体1和2(mNREV1和mNREV2)定位于内质网膜上。mNREV1具有mNRE相同的蛋白结构域和催化活性,mNREV2缺乏patatin结构域,没有催化活性。(4)饥饿增强具有催化活性的mNRE剪接变异体1的mRNA水平,而降低没有催化活性的mNRE剪接变异体2的表达,因此转录剪接是mNRE在小鼠能量稳态中的表达调节方式。(5)降低mNRE的表达抑制前脂肪细胞的分化和胰岛素诱导的脂肪细胞中甘油三酯的水平,表明NRE在脂肪细胞脂代谢中起一定作用。这些结果不仅是对NRE特定功能和表达调节的深刻认识,而且是对动物脂代谢和能量平衡新机理的揭示。
英文主题词NTE-related esterase; energy metabolism; expression regulation; adipocyte; mouse