离子通道P2X受体家族有7个亚单位 (P2X1-P2X7) ,属于配体门控的离子通道。本研究利用人胚肾HEK-293细胞为工具重组P2X受体,利用基因突变、荧光显微镜和膜片钳电生理技术相结合,结果发现①P2X2的单一位点突变体P2X2亚型的35对单位点半胱氨酸突变体中有4对单一位点突变体V48C/I328C 、R34C/G344C、Q37C/G342C、 Q37C/G344C可形成双硫键,P2X离子通道跨膜片段P2X2-I328C与P2X4 -V47C、P2X2 -V48C 与P2X5-I334C可形成功能性杂合子通道;②P2X2-I328C、P2X5-I334C突变体的YO-PRO-1 吸收光谱增加,表明通道进入扩张开放状态,说明P2X受体存在两个开放状态-开放、扩张开放状态;③福尔马林刺激后DRG内神经元内P2X3受体在蛋白表达、神经元的分布及电流改变呈现一定的时空表达模式,在神经元的中枢突分布的脊髓后角II层呈现相应的变化,说明背根节和脊髓后角P2X3表达上调与疼痛密切相关。这些结果从分子结构和生理特征来描述ATP 门控Ca2+跨膜的机制,部分阐明神经病理性疼痛的分子细胞机制。
英文主题词P2X receptor,ATP,disulfide bond, Cysteine mutation