中文摘要：

前列腺癌（PC）早期诊断困难,然目前尚无特异性PC诊断生物标记物。本组在前期工作的基础上发现β微球精蛋白（MSMB）转录调控区存在PC关联的常见变异，提出这些变异可能影响了MSMB调控区的转录活性，从而改变了MSMB表达的工作假设。为此，本项申请拟首先对发现变异的MSMB基因组及其连锁区域进行全测序，并经大样本验证研究和比较鉴别等统计遗传分析，证实发现的PC关联变异。然后，通过荧光素酶报告基因、免疫共沉淀-蛋白质谱、EMSA、super-EMSA以及ChIP等多种分子生物学实验来证明关联变异的功能机理，最后经PC患者的肿瘤免疫组织化学检测验证，以及血清学的MSMB表达水平与PC的关系，展开研究这些变异的功能机制，并初步评价功能性变异作为潜在分子标记物的作用。研究结果可能为MSMB是否是PC的一个易感基因提供支持性证据，同时也可能为临床应用提供依据。

结论摘要：

PC（prostate cancer, PC）是我国老年男性中常见的恶性肿瘤之一。人β-微球精蛋白基因（microseminoprotein beta, MSMB）定位于人类10号常染色体，其编码精浆蛋白(prostatic secretory protein, PRPS)。近来逐渐增多的研究证据显示MSMB在PC患者的PC组织中呈低表达，并且MSMB在PC组织中的表达程度与复发率成负相关1-2。然而，与癌旁组织比较，MSMB在PC中低表达的原因仍然不清楚。以此，我们提出假设MSMB调控区变异可能影响了MSMB的转录。为了回答我们提出的假设，发现MSMB调控区上潜在的PC病因学变异，本项开展了以下两方面实验1）在转录水平检测24 对PC及其癌旁组织中MSMB的表达，筛选出在癌组织中MSMB显著低表达的（≤3倍）样本对。2）利用下一代高通量测序技术筛查这些样本对MSMB基因及其上游80Kb的基因组连锁区域。3）分析影响MSMB差异表达的单核苷酸变异（single nuclear variants,SNVs)。结果1）24对PC及其癌旁组织中，有19对显示MSMB在PC中的表达低于癌旁组织，其中9对呈显著性低表达。2）靶向测序结果共识别165个SNVs,其中69个为已经报道的常见SNVs，96个为新发现的SNVs。96个变异中27个位于MSMB的上游基因组序列， 68个位于intron序列，1个位于AL450342基因的编码区。96个新发现先的SNVs中，经生殖系传递的SNVs有37个，均为A/G的变异，变异频率在10%-60%；PC特异性的体细胞变异共42个，40个为A/G变异，2个位T/C变异。42个体细胞的变异频率在10%-30%。MSMB上游5Kb的序列中，频率为30%的体细胞变异有2个，频率为20%的体细胞变异有5个。这7个变异位点被78%（7/9)的PC肿瘤所携带。165个SNVs中共有11个变异位于CG位点上，它们均为生殖细胞变异。9对样品的测序结果中均未发现MSMB的3'UTR序列上有变异位点。结论本研究在MSMB的转录调控区初步发现7个新的高频体细胞SNVs，它们可能参与PC组织中MSMB的转录调节。