黄病毒非编码区(UTR)在病毒复制中具有重要的调控功能,但其作用机制尚未明确。本研究首先发现2006年广州登革1型病毒分离株具有大小斑特征和不同的乳鼠神经毒力,其基因组非编码区序列和二级结构也存在较大差异;基于此,我们构建了登革1型病毒的全长感染性cDNA克隆、UTR诱导的报告基因以及含报告基因的复制子等反向遗传学系统;借助上述技术平台和生物信息学预测,发现了登革病毒5′UTR中的茎环结构B和3′UTR的可变区对病毒基因组复制和翻译的调控作用;证实了登革病毒在复制过程中可产生3′亚基因组非编码RNA,探讨了其对病毒基因组复制和翻译水平的不同调控作用;此外,还发现登革病毒衣壳蛋白编码区cHP结构和α螺旋结构对病毒RNA的复制不可或缺,可能具有重要调控作用。本研究成功建立了一系列登革病毒的反向遗传学技术平台,深入研究了黄病毒UTR和结构蛋白编码区中的不同元件在其复制和翻译中的调控作用,发现了一系列关键的RNA调控元件和核苷酸,为黄病毒的复制和翻译机制提供了新的认识。
英文主题词Dengue virus;RNA replication;UTR;Reverse genetics