脑缺血后神经功能的缺损是目前神经科学研究的热点,内源性神经干细胞具有自我增殖和分化能力,可能替代死亡的神经细胞而恢复神经功能,本研究从整体及细胞水平运用免疫组化(单标,双标),细胞标记示踪,细胞膜片钳技术、电子显微镜及western blot等手段研究脑缺血后神经干细胞的神经再生时空规律及补阳还五汤对NSCS增殖,移行、分化和功能性突触形成以及再生神经元电生理学的影响,以期揭示补阳还五汤的临床疗效
脑卒中所致的神经功能缺损严重影响幸存者的生活质量,促进患者功能恢复有着重要的治疗价值。成体脑内的神经干细胞使脑具有自我修复功能。本项目运用免疫组化、细胞示踪,电镜、western blot技术研究补阳还五汤对此的影响。发现补阳还五汤能促进缺血大鼠神经功能恢复,增加缺血大鼠脑皮层、海马区、室旁区nestin蛋白的表达,维持nestin的高值时间,并促进室旁区新生神经元的产生,在7、14、28天与模型组差异有显著性,且神经功能恢复与新生神经元数呈正性相关;还能增加新生神经元的突触联系,增强脑内GAP43、synapsin1的表达,在7、14、28天与模型组差异有显著性。补阳还五汤指标成分川芎嗪可在脑脊液中检测,含量低于血清,血清能促进干细胞贴壁分化而脑脊液影响不明显。含药脑脊液能促进低糖低氧损伤神经干细胞的增殖、移行及向神经元分化,在5、7、天明显优于空白脑脊液组;还能提高新生神经元的突触联系,增强新生细胞GAP43、突触素1的表达,在5、7天与模型组差异有显著性,但对电生理功能影响不明显。结果表明补阳还五汤能增强缺血脑的神经再生,促进神经功能恢复。