中文摘要：

晚期癌痛严重影响肿瘤患者的生活质量。N-甲基-D-天门冬氨酸受体2B亚基(NMDAR2B)在疼痛产生和中枢痛觉过敏的形成中发挥着主导作用。本研究拟运用基因工程技术构建rAAV/NMDAR2B病毒佐剂疫苗，通过诱导大鼠肠道免疫系统产生特异性抗体，应用蛋白质抗原表位分析和噬菌体肽库展示技术筛选NMDAR2B抗原表位，在此基础上，构建rAAV/NMDAR2B表位疫苗，评价其镇痛效应，为最终研制应用于临床的镇痛疫苗提供实验依据。镇痛疫苗的开发可带来疼痛治疗方法上的新突破，有望使广大疼痛患者从中获益。

结论摘要：

NR2B亚基在疼痛的产生和中枢痛觉过敏的形成中发挥着主导作用，特异性抑制或阻断NR2B可以达到良好的疼痛治疗效果，但目前已有的NR2B拮抗剂由于特异性不强而不能广泛应用于临床。我们应用现代疫苗技术，构建以NR2B为靶点的镇痛疫苗，产生特异性结合NR2B的抗体，发挥镇痛效应。本研究首先制备NR2B多肽疫苗，并以SNI模型观察该疫苗的镇痛效应。在此基础上，将NR2B基因插入腺病毒载体构建NR2B重组腺病毒疫苗，从痛感觉和痛情绪反应两方面观察了该疫苗的镇痛效应。进一步筛选NR2B模拟表位，构建NR2B表位DNA疫苗，并观察了该疫苗的镇痛效应。随后观察NR2B表位DNA疫苗对PC12细胞和体外培养神经元NR2B激活的影响，评价了疫苗的安全性。结果表明，NR2B重组腺病毒疫苗和NR2B表位DNA疫苗不仅都可以诱导机体产生体液性免疫应答，而且在神经病理性痛时NR2B抗体可通过血脑屏障进入神经中枢，与NR2B亚基结合，产生镇痛效应；NR2B表位DNA疫苗可降低谷氨酸损伤PC12细胞和神经元胞内钙水平，具有较高的安全性。本研究成功构建了基因镇痛疫苗，开辟了在慢性疼痛治疗中基因免疫镇痛这一全新领域。