中文摘要：

为了对癌淋巴道转移进行分子水平上的解析，我们采用抑制性消减杂交的方法对自建的高低转移力小鼠肝癌细胞之间的基因表达水平上的差异进行检测。通过T/A克隆技术克隆在高转移力癌细胞中高表达的基因片段并进行序列测定，生物学信息检索后对未知片段以SMART-RACE技术获得全长的cDNA序列并进行序列测定。然后构建新cDNA序列的表达载体并转染至低转移力肝癌细胞中观察转染后细胞转移能力的变化，以鉴定新cDNA序列的生物学功能。本研究如获资助并完成，可获得一条或几条与癌淋巴道转移相关的全长新基因，对癌淋巴道转移机制的深入理解有着重要的理论意义。并可使我课题组在癌淋巴道转移机制研究领域达到国际领先水平。同时新基因有可能成为癌转移诊断试剂开发和抗转移药物开发的新线索。

结论摘要：

肿瘤转移是一个多基因参与的复杂过程，由其所导致的恶性肿瘤患者死亡率高、预后差和其发生机制不清长期以来一直是肿瘤学领域的突出矛盾。本研究利用基因芯片比较不同淋巴道转移力小鼠肝癌腹水型细胞株Hca-F（高转移）和Hca-P（低转移）的基因表达谱，目的在于筛选出与肿瘤淋巴道转移相关的基因，为进一步阐明肿瘤淋巴道转移的分子机制奠定实验基础。分别提取两种细胞的总RNA，反转录合成生物素标记的cRNA探针，与Affymetrix GeneChip MOE430A（包括22690个转录本，对应约14500个小鼠已知基因和4371个EST）杂交。结果F中表达上调≥2倍的已知基因有901个（6.2%），EST有129个（3%）；P中分别是593个（4.1%）和 208个（4.8%）。据GO（Gene Ontology）分类和TreeView分析，其中已知差异基因分别与组织发生、细胞黏附、信号转导、细胞生长、分化、代谢、转录等生物学过程，以及转运、运动、激酶活性、蛋白质结合和受体活性等分子功能有关。荧光定量PCR进一步验证了基因芯片的结果。因此，表达芯片与转移模型相结合为肿瘤转移研究提供新方法、新思路。