研究内容利用以二乙基亚硝胺诱发所获得的家兔肝细胞癌组织,通过在同品种幼兔体内的反复传代适应,获得在家兔体内可移植生长的瘤株,并完成该瘤株的生长特性鉴定。此外,开展家兔肝细胞癌在裸鼠体内的传代研究,获得一个裸鼠移植株,并通过观察传代过程中细胞表面标志和成瘤率的情况,初步分析探讨肝细胞癌中肿瘤干细胞存在与否和自我更新情况。同时,该裸鼠瘤株为家兔移植传代研究的意外提供补救措施。研究意义肝癌临床治疗的突出进展集中在手术和介入治疗等方面,这些治疗方案的实验研究迫切需要体型较大的动物模型,本课题的完成将满足上述需求。此外,近两年引起广泛重视的肿瘤干细胞学说将有可能引起对肿瘤生物学特性的认识和治疗方案的重新评价,本课题将首次探讨肝癌肿瘤干细胞问题。
肝癌临床治疗的突出进展集中在手术和介入治疗等方面,这些治疗方案的实验研究迫切需要体型较大的动物模型,本课题利用以二乙基亚硝胺诱发所获得的家兔肝细胞癌组织开展家兔肝细胞癌模型研究。首先在裸鼠体内进行了传代研究,获得一个肝细胞癌裸鼠移植株,致瘤率100%,并伴有部分肝、脾、肾转移。将该移植株进行细胞培养,获得家兔肝细胞癌细胞株,进行了生物学签定,其裸鼠接种致瘤率100%,肿瘤组织AFP呈阳性。利用已建成的兔肝细胞癌裸鼠移植瘤和细胞系进行了同品种家兔体内传代接种试验。在应用20mg/kg 的CsA 的条件下,家兔眼前房接种第8 天,观察到肉色的成活肿瘤组织小块,并逐渐生长。经连续在家兔眼前房传代至第9 代,CsA 的应用剂量不少于15mg/kg肿瘤仍能生长。我们对小鼠主要组织相容性复合体在鼠肝癌H22 中的表达情况的研究表明,小鼠H22 肝癌细胞H-2 分子在在蛋白水平出现表达下调,这种细胞表面H-2 分子相应蛋白表达的下调可能与小鼠H22 肝癌的可移植性有关。利用RNAi 技术,通过构建含diRNA的质粒转染兔肝癌细胞株并接种于兔眼前房,10mg/kg 的CsA 的条件下,接种肿瘤能生长。