中文摘要：

慢性乙型肝炎病毒感染是世界范围性的重大难题，迄今没有满意的治疗方法。研究表明HBV的持续感染和复制依赖于肝细胞核内HBV 复制中间体cccDNA的持续存在和转录活性。RNA干扰技术（RNAi ）不仅在转录后水平降解病毒RNA，而且能导致DNA甲基化，在转录水平抑制基因表达，因此在病毒性疾病的治疗中具有极大的应用前景。本项目采用分子模拟、基因重组、转染及RNA酶保护法、定量荧光PCR等技术通过体外及

结论摘要：

慢性乙型肝炎感染是世界范围性的重大难题，迄今为止没有满意的治疗方法。RNA 干扰（RNAi ）是近年来发现的具有突破性的生物学现象。利用RNA干扰技术，在HIV，HCV等病毒的实验中体现出较好的抑制效果。目的为了证明在抗HBV的实验中，RNA干扰技术具有同样有效的抑制功能，为以后的抗HBV治疗提供一种新的思路。方法本项目采用分子模拟、基因重组、转染、放射免疫法、荧光定量PCR、转基因小鼠等技术，通过体外及体内实验，分别从RNA、蛋白质及DNA 水平,研究RNAi 对HBV 感染和复制的抑制性调节，并观察其对HBV cccDNA 的影响。结果成功构建了多个shRNA表达质粒载体；获得表达有效shRNA的重组腺病毒；建立了载体法筛选HBV S基因的siRNA靶位体系；在HepG2.2.15细胞中，作用组较对照组的HBsAg和HBeAg的抑制率分别为43%和64%。重组腺病毒作用组较对照组HBsAg下降47％，但是HBVcccDNA没有显著性差异。结论载体法表达的针对HBV的shRNA可以在体内外有效抑制HBV蛋白的表达，但是对HBVcccDNA的影响没有显著差异。