中文摘要：

癫痫是神经科常见疾病，约30%的患者对抗癫痫药不敏感而成为难治性癫痫。目前对耐药机制的研究及治疗已成为难治性癫痫研究的热点和难点问题。本研究在以往研究工作基础上，提出难治性癫痫的病理因素以郁、风、痰、毒为主，采用复方柴贝止痫颗粒辨证论治，收到了较好的临床疗效。并在此理论的指导下，引入难治性癫痫动物模型，以中医药对耐药基因、蛋白高表达的干预作用为切入点，在体、离体实验相结合，采用实时荧光定量PCR技术、微透析联合高效液相色谱等技术，观察中药复方柴贝止痫颗粒对难治性癫痫大鼠行为学、脑部病理组织形态学的改变及对耐药基因、蛋白表达的调节作用，探讨中药干预难治性癫痫可能的分子病理机制，同时以药示理，反证难治性癫痫多药耐药机制，并首次提出难治性癫痫肝郁气滞、风痰闭窍、毒滞脑络的病机假说，以期寻找中医药提高难治性癫痫临床疗效的突破口。

结论摘要：

难治性癫痫（IE）患者的主要特征是对绝大多数抗癫痫药物（AEDs）耐药，即使这些抗癫痫药的作用途径不同。近年来许多研究认为多药耐药基因MDR1及其编码蛋白P-糖蛋白（P-gp）的高表达可能是耐药的机制之一。P-gp在IE患者及动物模型脑部的高表达限制了病灶内AEDs的浓度。因此，抑制P-gp/MDR1的高表达来提高 AEDs在病变脑组织的浓度已成为IE领域研究的热点。临床上以中药复方柴贝止痫汤联合抗癫痫药物治疗难治性癫痫可以减少患者的发作次数，减轻发作程度，从而提高抗癫痫药物的疗效。据此推测，柴贝止痫汤可能通过抑制脑内耐药蛋白的高表达来增加脑内抗癫痫药物的浓度，提高疗效。为观察柴贝止痫汤对P-gp/MDR1表达的影响，本研究采用侧脑室注射海人酸的方法建立癫痫持续状态后慢性难治性癫痫大鼠模型，分设模型组、西药组、中药组、中西药组、正常组和假手术组。每个组又设给药1月和给药3月两个亚组。给药结束后观察各组大鼠行为学、脑电图、病理组织形态的变化和差异，以评价各种干预方式的疗效；应用Western blot和Real-time PCR技术检测各组大鼠脑内P-gp/MDR1 mRNA表达的情况并比较组间表达差异；采用微透析技术检测柴贝止痫汤干预难治性癫痫大鼠后海马CA3区细胞外液中卡马西平的浓度，以评价柴贝止痫汤对血脑屏障P-gp转运功能的影响；通过体外实验培养大鼠脑微血管内皮细胞，观察柴贝止痫汤对离体血脑屏障上P-gp和MDR1 mRNA 表达的影响。实验结果发现（1）柴贝止痫汤与卡马西平联合治疗难治性癫痫大鼠，减少痫性发作次数、减轻发作程度、抑制海马异常放电的疗效最好；（2）柴贝止痫汤、卡马西平、柴贝止痫汤与卡马西平联用都能减轻模型大鼠海马各区及皮层的神经元损伤；（3）柴贝止痫汤能够下调难治性癫痫大鼠海马和皮层MDR1a mRNA、MDR1b mRNA的水平，降低 P-gp表达。（4）柴贝止痫汤含药血清可以降低地塞米松、L-谷氨酸诱导的大鼠脑微血管内皮细胞P-gp/MDR1 mRNA表达升高。这可能是其治疗难治性癫痫的机制之一，柴贝止痫汤与适当的抗癫痫药物合用，将有助于难治性癫痫的治疗。