本项目利用高、低转移性肝癌和肺癌细胞,分析磺酰化脑苷脂、磺酰化Lewis抗原的差异性表达,分析磺酰化糖链结构与肿瘤转移之间的相关性;利用表达质粒使脑苷脂磺酰基转移酶和糖蛋白磺酰基转移酶基因转入肿瘤细胞并使之过高表达,进一步观察磺酰化产物对肿瘤细胞转移行为的影响;利用整合蛋白、E-钙粘蛋白的表达、磷酸化水平以及其本身糖链的磺酰化程度,探讨可能的作用途径;利用RNA干扰技术促使脑苷脂磺酰基转移酶和糖蛋白磺酰基转移酶基因表达缄默,以验证磺酰化糖链产物对肿瘤细胞转移的影响,验证糖链结构中半乳糖基磺酰化是影响肿瘤转移过程的重要因素之一,并为进一步研究磺酰化调控糖链唾液酸的合成机制打下重要的基础。
本研究观察到在高转移能力的肝癌细胞具有较高表达的sulfo-LacCer和sulfo-Lewis,在肿瘤病人中,表达高的肿瘤转移倾向较高。无论是CST还是GP3ST基因过表达时,都对肝癌细胞的转移潜能具有促进作用,对细胞外基质黏附加强,在裸鼠体内转移能增强。不管CST还是GP3ST过表达所产生的酸性糖链产物都使整合蛋白alpha v 表达增高,不论外源性加入sulfo-LacCer还是sulfo-Lewis a也都使肝癌细胞整合蛋白alpha v的表达都有明显的上调,并以时间与剂量依赖的方式调节,其中以24小时2mmol为最明显;但是经CST或GP3ST基因的RNA干扰以后,该整合蛋白表达则下降。