新疆是我国包虫病高发区之一,研制有效的控制包虫病流行的新型疫苗是促进西部牧区经济发展的迫切需要。本研究为预防和根治新疆包虫病,构建针对终末宿主犬的重组蛋白疫苗,并研究该疫苗的免疫保护性。方法是利用基因重组技术,将在原头蚴有表达的egG1Y162抗原编码基因插入大肠杆菌-分支杆菌穿梭表达载体pBCG,构建pBCG-egG1Y162,将其在BCG中进行表达,免疫小鼠感染模型,检测抗体效价、T淋巴细胞增殖反应、Th1/Th2/Treg/Th17细胞和其细胞因子、及NK细胞活性等各项指标,探讨重组BCG-egG1Y162疫苗对宿主抵抗棘球蚴感染的免疫保护作用,评价其应用前景;在此基础上,进一步免疫细粒棘球绦虫终末宿主犬,观察该疫苗的现场保护效果,为寻找控制包虫病传染源的有效疫苗奠定基础。
Echinococcus granulosus;EgG1Y162 antigen;recombinant BCG vaccine;immunization;immunoprotection
新疆是我国包虫病高发区之一,研制有效的控制包虫病流行的新型疫苗是促进西部牧区经济发展的迫切需要。本研究为预防和根治新疆包虫病,构建针对终末宿主犬的重组蛋白疫苗,并研究该疫苗的免疫保护性。方法是利用基因重组技术,将在原头蚴有表达的egG1Y162 抗原编码基因插入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pBCG,构建pBCG-egG1Y162, 将其在BCG 中进行表达,免疫小鼠感染模型,检测抗体效价、T 淋巴细胞增殖反应、Th1/Th2型细胞因子等各项指标,探讨重组BCG-egG1Y162 疫苗对宿主抵抗棘球蚴感染的免疫保护作用,评价其应用前景;在此基础上,进一步免疫细粒棘球绦虫终末宿主犬,观察该疫苗的现场保护效果。通过本研究成功构建pBCG-egG1Y162穿梭表达载体,并经热诱导纯化出分子量大小约为71KD的重组BCG-egG1Y162 蛋白;该蛋白与感染犬血清存在阳性反应,且能诱导感染小鼠产生67.4%的免疫保护作用,对终末宿主犬也有一定的保护作用,为寻找控制包虫病传染源的有效疫苗,进一步开展包虫病的防治提供理论和实验基础奠定了理论及实验基础。