在多种物种的生殖系细胞(germline)中都发现了一类特殊的非编码小RNA,它们在减数分裂起始前聚积,因为它们与生殖系细胞特异蛋白质PIWI相互作用,所以被命名为piwi-RNA(piRNA)。它们可能以一种不同于siRNA和miRNA的干扰途径沉默基因参与配子形成,如精子发生。piRNA 的胞内主要蛋白质合作者PIWI,是Ago 家族成员,该家族多个成员参与RNAi效应及miRNA介导的基因沉默,是RNA基因沉默复合物的核心组分,这暗示我们PIWI在piRNA介导基因调控中可能有重要功能。piRNA的表达可能也与PIWI相关。目前我们对于piRNA的生成、作用机制及细胞功能等都知之甚少。本项目将聚焦于PIWI和piRNA。我们将利用酵母双杂交系统,筛选HIWI辅助蛋白因子,并研究它们在piRNA诱导基因沉默途径中的功能;我们将克隆人PIWI基因hiwi,表达纯化HIWI蛋白,体外研究它与piRNA的相互作用;我们还将调查piRNA的生物学功能。通过本研究,不仅可以深入了解HIWI及其辅助因子的结构功能,还可以进一步揭示piRNA诱导基因沉默的分子机制及与配子形成的联系。
英文主题词piRNA;HIWI;RNA-mediated gene silencing;RNAi;Argonaute family