中文摘要：

前期的研究发现氟致破骨细胞凋亡，适量的硒能延长氟致破骨细胞的凋亡。本项目利用学科交叉的优势，从研究细胞信号转导分子及氧自由基介导的氟化物和成骨细胞凋亡的规律入手，用细胞培养、流式细胞技术、电子顺磁共振波谱仪、放射免疫分析技术、透射电镜和荧光显微镜，在细胞和分子水平上揭示氟诱导成骨细胞凋亡的机制，阐明氧自由基作为信号转导分子刺激原癌基因c-fos、bcl-2表达，加速细胞因子IGF、TNF、IL-1和IL-6转化，促进成骨细胞凋亡的特征。通过添加不同剂量的硒探讨硒对氧自由基介导的氟致成骨细胞凋亡的化学保护作用。从硒维持成骨细胞结构的完整性，降低氟对成骨细胞的破坏入手，建立经济、有效的防治动物氟中毒的技术方案。

结论摘要：

山羊成骨细胞染氟48h，1.0×10－7～10－5mol/L氟促进成骨细胞增殖，增加ALP活性及钙化能力，1.0×10－3mol/L氟抑制增殖；10－4及5×10－4mol/L氟48h对增殖无影响，96h后抑制增殖。电镜观察，成骨细胞突起收缩，胞间连接断裂，胞膜不完整，微绒毛减少；胞突减少，胞核变形，胞膜不完整；细胞染色质浓缩、边集；线粒体肿胀，粗面内质网扩张。氟致成骨细胞早期和晚期凋亡率分别为3.33％和2.92％。10－5～2.5×10－3mol/L氟使DNA断裂，诱导成骨细胞凋亡，10－3及2.5×10－3mol/L氟使成骨细胞G0/G1期减少，S期增多。提取绵羊成骨细胞总RNA，扩增OCN，测序。OCN基因长297bp，该序列GeneBank 登记号为DQ418490。小鼠成骨细胞加入氟培养，提取RNA，定量检测OCN基因。各浓度氟均刺激OCN基因表达，呈剂量依赖性，当氟浓度为5×10-4mol/L时OCN基因表达显著增加。小鼠成骨细胞接种不同浓度硒溶液，48 h，高于0.4mg/L硒抑制细胞增殖，低于0.2mg/L硒促进增殖。硒对成骨细胞的增殖和活力为双向调节，呈剂量依赖性。