中文摘要：

胚胎致密化是植入前胚胎发育过程中的一个非常重要的环节，与胚胎体外发育总体效率和胚胎的质量直接相关。课题以水牛为研究对象，构建了一套快速准确的检测水牛致密化基因Cx43,Cx31和E-cad表达的荧光实时定量PCR方法。系统研究了缝隙连结蛋白基因和上皮钙调素蛋白在水牛IVF和孤雌发育胚胎中的早期表达变化规律。 结果表明3个致密化相关基因在水牛体外培养早期胚胎中均有表达，但具有明显不同的mRNA表达方式。探索了组蛋白乙酰化酶抑制剂TSA、海澡糖处理对水牛体外胚胎生长及Cx43基因表达的影响。适宜浓度TSA处理水牛成纤维细胞可以显著提高Cx43基因的表达水平。当TSA处理体细胞核移植胚胎一定时间，50nmol/L的处理浓度可以提高核移植胚胎的体外发育能力。Cx43蛋白在胚胎发育的各个时期均有表达，其中在2、4、8细胞期，Cx43蛋白在IVF和SCNT两种类型胚胎的卵裂球中均有大量表达，在桑椹胚和囊胚期，Cx43蛋白的表达明显减弱，且在桑椹胚和囊胚期，体细胞核移植胚胎中Cx43蛋白的表达明显弱于同时期的体外受精胚胎。10ug/mL海澡糖能促进水牛体外受精早期胚胎的发育,有助于后期囊胚形成。