蜜蜂最重要的生殖特征是一雌多雄交配,蜂王交配后将精子贮存于受精囊中长达数年之久,并仍能保持活力,这些特征使蜜蜂成为研究精子长期贮存的模式动物。本研究利用蛋白质组学技术,研究了不同繁殖阶段蜂王受精囊、雄蜂精液和附腺的蛋白质组表达情况,建立了可溶性总蛋白的双向凝胶电泳对照图谱。并利用高效液相色谱-质谱联用(LC-ESI-MS/MS)技术鉴定了其中的55个丰度较大及感兴趣的蛋白点,根据这些蛋白的生物学功能进行分类,包括代谢相关蛋白、抗氧化蛋白、转运蛋白等。在这其中,抗氧化蛋白在精子贮存中发挥最为重要的作用。本研究还通过差减杂交和RT-PCR的方法获得了两个全新基因。AmSSP1基因仅在蜂王受精囊中而不在卵巢和中肠中表达,预计编码包含620个氨基酸残基,约为71 kDA的蛋白,在老蜂王中的表达要高于新蜂王和处女王。SPR16在蜂王受精囊和卵巢中表达,但不在工蜂中肠表达,且老蜂王受精囊中表达量高于处女王和新交配蜂王,预计编码包含363个氨基酸残基,约为41 kDA的蛋白。这两个基因在精子贮存和蜂王发育中发挥着重要作用。
英文主题词queen;sperm storage;protemic methods;gene