中文摘要：

严重创伤、休克等临床重症存在血管低反应性，它严重制约着休克等临床重症的治疗，目前其机制研究主要集中在血管平滑肌细胞（VSMC）本身。本实验室前期研究发现血管内皮细胞（VEC）与VSMC间的肌内皮缝隙连接（MEGJ）参与了休克后血管舒缩功能的调节，MEGJ的重要组成蛋白缝隙连接蛋白Cx43参与了这一过程，但机制不清。本课题拟用失血性休克大鼠模型，用血管环、VEC与VSMC双室培养及等离子体模式化共培养方式，重点研究Cx43 Ser368和Ser262位点磷酸化在休克血管反应性调节中的作用；不同位点磷酸化的调控机制及对MEGJ通道功能（包括活化通道数量和/或通道门控）的调节。希望深入了解Cx43在休克血管反应性中的调节作用及机制，为寻找有效的恢复血管反应性的药物提供实验依据和新的治疗靶点。

结论摘要：

严重创伤、休克等临床重症存在血管低反应性，它严重制约着休克等临床重症的治疗，目前其机制研究主要集中在血管平滑肌细胞（VSMC）本身。本实验室前期研究发现血管内皮细胞（VEC）与VSMC间的肌内皮缝隙连接（MEGJ）参与了休克后血管舒缩功能的调节，MEGJ的重要组成蛋白缝隙连接蛋白Cx43参与了这一过程，但机制不清。本课题采用失血性休克大鼠模型，用血管环、VEC与VSMC共培养方式，重点研究Cx43磷酸化在休克血管反应性调节中的作用，Cx43 Ser368和Ser262位点磷酸化的调控机制和对MEGJ通道功能的调节以及参与休克血管反应性调节的下游机制。研究结果发现1）Cx43磷酸化参与了失血性休克血管反应性的调节；2）Cx43 Ser262和Ser368位点磷酸化可能通过调节内皮和血管平滑肌间的肌内皮缝隙连接(MEGJ)的通道功能，改变血管平滑肌细胞（VSMC）反应性，参与休克血管低反应性的调节；而PKC不同亚型可通过诱导Cx43不同位点的磷酸化来参与休克血管反应性的调节；3）Cx43磷酸化介导的通道功能的改变，可能通过影响信使物质cAMP、cGMP在细胞间通道传递、通过VSMC钙敏感性调节途径来发挥调节休克血管反应性的作用。以前对休克血管低反应性的研究主要集中在血管平滑肌细胞本身，很少研究内皮细胞与血管平滑肌细胞间的直接作用，本项目在前期研究基础上，首次从MEGJ通道的重要组成蛋白Cx43位点磷酸化入手研究它在休克血管反应性中的作用和可能的调控途径及机制。并通过构建血管平滑肌细胞和血管内皮细胞的共培养模型，从细胞水平上测定血管细胞的收缩反应性、直观观察Cx43位点磷酸化引起的MEGJ通道功能变化及其在血管反应性调控中的作用。这些问题的阐明可从一个新的角度解释休克血管低反应性的发生机制，并为寻找有效的恢复休克等临床重症的血管低反应性提供新的调控靶点，为严重创伤/休克的治疗开辟一个新的方向。相关研究工作已发表SCI论文1篇（已接受），中文统计源期刊4篇，还有1篇英文论文正在投稿、1篇正在撰写。