国内外针对半抗原的手性抗体研究很少,基础工作非常缺乏。本项目围绕氧氟沙星左旋异构体、右旋异构体和消旋体开展了抗体制备、免疫识别特性、免疫分析方法研究。结果如下1)分离出氧氟沙星左旋体和右旋体两种半抗原,分别获取了针对左旋体、右旋体和消旋体的三种单克隆抗体,首次发现氧氟沙星抗体具有很强的手性选择性;2)从单克隆杂交瘤细胞出发,克隆抗体的全套基因,构建氧氟沙星左旋体、右旋体和消旋体Fab工程抗体,并在其基础上改造为scFv工程抗体,进而发现三种手性对映异构体的重链可变区一级序列相同,同时左旋和右旋对映体的抗体轻链可变区一级序列相同,并与消旋体的轻链可变区一级序列非常相似,仅在CDR区区别较大;3)基于氧氟沙星三个单克隆抗体,建立了酶联免疫分析方法,为食品安全监管提供了有力的技术手段。
英文主题词ofloxacin; ScFv; enantioselective; immunoassay