中文摘要：

Dravet综合征（DS）属难治性癫痫，钠离子通道α1亚单位基因SCN1A是其主要致病基因,少数患儿发现原钙粘蛋白PCDH19和钠离子通道SCN9A基因突变。本研究用PCR-DNA直接测序和MLPA的方法筛查患儿SCN1A基因突变, 明确我国DS患儿SCN1A基因突变特点及基因型与表型关系,协助早期诊断；对父母进行突变分析，确定患儿突变来源；用等位基因特异性PCR方法分析新生突变的等位基因来源；对父源新生突变和少数不能明确来源的新生突变，对患儿父亲的精子采用普通PCR和实时定量PCR的方法确定精子中是否携带突变及突变含量；进一步通过等位基因特异性PCR和实时定量PCR筛查患儿父亲或母亲的外周血和其他组织中SCN1A基因突变的有无及其含量，明确DS患儿父亲或母亲是否为突变嵌合体，预测患儿父母再次生育基因突变携带者的风险。对未发现SCN1A突变的患儿进一步筛查PCDH19和SCN9A基因突变。

结论摘要：

Dravet综合征（DS）属难治性癫痫，钠离子通道α1亚单位基因SCN1A是其主要致病基因，少数患儿发现原钙粘蛋白PCDH19和钠离子通道SCN9A基因突变。目前本研究共收集了635例DS患儿及其父母的临床资料及外周血DNA，111例患儿父亲精液和8例怀疑突变嵌合体的父亲或母亲唾液、颊粘膜、尿液、毛囊等多组织样本DNA，建立DS遗传样本库。其中452例发现SCN1A基因突变(包括MLPA发现该基因片段缺失或重复13例)，SCN1A基因突变率71.2%。对392例SCN1A突变阳性的患儿，采用PCR-Sanger直接测序和MLPA的方法对其父母进行SCN1A突变筛查，发现50例为遗传性突变（含21例父母一方为突变嵌合体），342例为新生突变。2个Dravet综合征患儿家系已完成再生育的产前诊断。22例新生突变患儿采用等位基因特异性PCR证实19例（86.4%）的突变位于父源等位基因。对Sanger测序认为“新生突变”的174例DS患儿及其父母外周血DNA采用PGM方法发现15例（8.6%）遗传自父母一方嵌合体。采用Raindrop PCR方法发现有4例父亲和1例母亲DNA有Sanger测序未见到的低频嵌合突变。对Dravet综合征患儿SCN1A突变筛查及突变来源的研究，对于患儿的抗癫痫药的选择和家庭的遗传咨询及再生育产前诊断具有重要的指导价值。本研究进一步对SCN1A基因突变阴性的75例女性患儿筛查原钙粘蛋白PCDH19基因，发现6例有PCDH19突变，占SCN1A突变阴性女性Dravet综合征8%，1例遗传性突变，4例新生突变。对Dravet患儿PCDH19基因突变的筛查，有助于进一步阐明Dravet综合征的发病机制。本研究通过二代测序癫痫基因检测包筛查SCN1A突变阴性DS患儿26例，发现Dravet患儿SCN1B基因突变和GABRG2B基因突变各1例，为罕见病例,未发现SCN9A基因突变。本研究培养博士研究生3名，已发表论著6篇，其中SCI收录3篇。研究论文参加国内学术会议2次，国际学术会议2次，其中1论文在第六届CAAE国际癫痫论坛大会报告并获优秀论文一等奖。